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抗人白细胞介素15单克隆抗体的制备、鉴定和初步应用

发布时间:2021-01-09 05:11
  目的:白细胞介素15(IL-15)是与白细胞介素2(IL-2)有相似生物学活性,但无序列同源性的新细胞因子,其体内分布远较IL-2广泛,在免疫调节和免疫应答尤其是在抗肿瘤免疫应答中有重要作用。对IL-15的鉴定和研究均需有抗IL-15的抗体。本研究的目的是用细胞工程的方法制备鼠抗人IL-15单克隆抗体(简称单抗),鉴定其生物学和免疫学特性及理化特性,并初步探讨其应用。 方法:自重组人白细胞介素15(rhIL-15)基因工程菌提取融合蛋白GST-IL-15,12%SDS-PAGE电泳鉴定,依据牛血清白蛋白(BSA)的浓度目测选择蛋白量为50μg的凝胶条带切下制备免疫原,免疫BALB/c小鼠5次,第一次与第二次免疫间隔4周,其后每次免疫间隔2周,融合前三天以rhIL-15包涵体蛋白(rhIL-15IBP)攻击。取免疫脾细胞与骨髓瘤细胞株Sp2/0,用50%聚乙二醇(PEG)融合,HAT培养基选择培养出融合细胞。用rhIL-15IBP为抗原,间接ELISA法,初筛分泌抗rhIL-15IBP抗体的融合细胞,有限稀释法克隆化培养获得稳定分泌抗rhIL-15IBP单抗的阳性杂交瘤细胞株,最后以国际... 

【文章来源】:河北医科大学河北省

【文章页数】:70 页

【学位级别】:硕士

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研究论文 抗人白细胞介素15单克隆抗体的制备、鉴定和初步应用
    前言
    材料与方法
    结果
    讨论
    参考文献
    附表
    附图
综述 IL-15与肿瘤相关关系的研究进展
致谢
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