环状10-23结构脱氧核酶的体内外活性研究

发布时间：2021-01-09 08:02

　　脱氧核酶（Deoxyribozyme, DNAzyme, DNA enzyme），又称DNA酶或酶性DNA，是具有催化活性的DNA分子。脱氧核酶是继蛋白质酶、核酶之后生物催化剂家族的又一新成员。与前两者不同的是，自然界中似乎不存在天然的脱氧核酶，目前发现的脱氧核酶都是通过体外选择方法（SELEX）得到的。自Breaker等1994年首次报道了具有RNA切割DNA分子以来，人们通过体外筛选得到了多种具有催化功能的DNA分子。与核酶相比，脱氧核酶具有分子小、特异性好、催化效率高等特点，在基因治疗、疾病诊断及分子生物学分析工具等方面具有潜在应用价值。目前研究最多也最具应用价值的是10-23结构脱氧核酶，该结构由15个脱氧核苷酸组成的保守序列构成其催化活性中心，两侧各连接一段灵活的底物结合序列。从理论上只需调整其底物识别区的核苷酸组成。此脱氧核酶可切割任何含AU的RNA分子。这一特性使之在基因治疗（反义疗法）方面有巨大应用潜力，也就是意味着针对任何一种致病基因的mRNA，可以设计出具有高度特异性的脱氧核酶来抑制有害基因的表达，从而达到基因治疗的目的。本研究选用的10-23结构脱氧核酶是Sant... 

【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：39 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
提 要
概述
    1.1 概述
    1.2 脱氧核酶的结构
    1.3 脱氧核酶的应用
    1.4 本研究的意义
第二章 实验材料
    2.1 仪器与试剂
        2.1.1 实验仪器
        2.1.2 试剂与溶液的配制
        2.1.3 酶和试剂及来源
第三章 实验方法及原理
    3.1 实验原理与流程
        3.1.1 实验原理
        3.1.2 实验流程
    3.2 环状脱氧核酶体外切割反应
        3.2.1 RNA底物设计合成
        3.2.2 底物的放射性标记
        3.2.3 环状脱氧核酶的体外切割反应
    3.3 环状脱氧核酶的体内复制与活性测定
第四章 结果
    4.1 环状脱氧核酶的体外切割活性
    4.2 环状脱氧核酶的体内活性及复制
第五章 讨论和总结
    5.1 环状脱氧核酶的体外切割分析
    5.2 环状脱氧核酶的体内活性及复制分析
    5.3 总结
参 考 文 献
攻读硕士期间发表的论文
致 谢
摘 要
ABSTRACT



本文编号：2966274