人HSP70D的表达纯化及其免疫佐剂样效应研究

发布时间：2021-01-14 03:46

　　热休克蛋白（Heat shock protein，HSP）的佐剂样效应以及在抗肿瘤及抗感染免疫中的应用，一直是HSP研究领域的热点，HSP70作为热休克蛋白家族的重要成员，有大量的报道和研究证实，从肿瘤组织中分离的HSP70在动物体内能诱导出明显的肿瘤特异性CTL，对随后接种肿瘤细胞具有抵抗作用。采用HSP70-抗原肽复合物作为疫苗诱导抗肿瘤抗感染免疫已经进入临床试验阶段并显示了良好的应用前景。但作为个性化的治疗模式，该方案难以产业化，因此体外表达HSP70分子，然后与抗原肽交联，可能成为一种新型疫苗和新的治疗模式，在本研究中，我们采用原核表达系统，对人HSP70D分子进行大规模的表达纯化，旨在建立一种新的HSP70纯化的方式，研究所纯化的人HSP70D的佐剂样效应，并将其应用于肿瘤的免疫治疗。 首先，根据人HSP70D cDNA序列设计一对包含HSP70D全长编码区的PCR引物。其中上游引物为5’TA CAT ATG GCC AAA GCC GCG GCA GTC G（包含起始码ATG，5’端包含Nde Ⅰ酶切位点），下游引物为5’TG CTC GAG ATC TAC CTC ... 

【文章来源】：中国人民解放军海军军医大学上海市 211工程院校

【文章页数】：81 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

HSP7oDPCR产物琼脂糖凝胶电泳分析

转化大肠杆菌DH5a，克隆流程图见图己1从汤口I酶切鉴定(图9)。电泳结果显示，阳性插插入片段条带以及一条约5300bp的载体条带，而bP的载体条带，或得到未切开的质粒条带。1234567

7pET24a一HSp7oD重组子的T7引物测序结果(部分)ig.7SequeneingdiagramofPET24a一HSP70DreeombinantwithT7Primer.


本文编号：2976148