人促甲状腺激素受体cDNA活化的脾细胞免疫同源BALB/c小鼠建立Graves病动物模型的研究

发布时间：2021-01-17 02:39

　　目的:用人促甲状腺激素受体（hTSHR）的全长cDNA基因免疫BALB/c小鼠后,再以其活化的脾细胞免疫同源BALB/c小鼠而获得类似人类Graves病的动物模型,从而为进一步的研究奠定基础。 方法:第一阶段,将6-8周龄的雌性BALB/c小鼠随机分为两组（a组和b组）,以布比卡因和对羟基苯甲酸甲酯预处理后,分别用重组质粒pcDNA3.1/hTSHR和空质粒pcDNA3.1（+） 100μg胫前肌注射,第3和6周加强免疫两次。18周时分别处死两组小鼠,机械分离其脾细胞。第二阶段,分别用前述a组（注射重组质粒组）和b组（注射空质粒组）小鼠的脾细胞免疫同源的两组6-8周龄雌性BALB/c小鼠（实验组和对照组）。4周后处死动物,分离其甲状腺行普通光学显微镜和透射电镜检查;摘眼球取血,以放射免疫法测定小鼠血清TT₄水平、免疫放射法测定血清TSH水平和ELISA法检测血清TRAb。 结果:实验组16只小鼠中的7只小鼠（44%）出现甲状腺肿大、充血。光镜下见明显的小滤泡增生,滤泡上皮细胞增多、变大呈高立方形,偶见小乳头形成突向滤泡腔内;腔内胶质含量少,部分可见吸收空泡;滤泡间... 

【文章来源】：重庆医科大学重庆市

【文章页数】：45 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

重组质粒和空质粒电泳结果

重庆医科大学硕士研究生毕业论文ification of the recombinant and blank plasmid by lectrophorearker（λDNA/Hind III）；: PcDNA3.1/hTSHR；NA3.1(+).A3.1/hTSHR 重组质粒的酶切鉴定 （ + ）含有 Hind III 、 BamH I 及 Xba I 等多HR 重组质粒分别经 BamH I 和 EcoR I 单酶切，切带；当质粒经 EcoR I 和 Xba I 双酶切时则可切出一条R cDNA 片段的大小）。(见图 2)。1

/hTSHR 重组质粒和 PcDNA3.1(+)大量提取的电泳 the recombinant plasmid and blank plasmid by elect(λDNA/Hind III)；+）；1/hTSHR.紫外分光光度计鉴定纯度和含量（表 1）。其内毒素和蛋白质污染，可进一步用于免疫动表 1 质粒纯度和含量的测定结果A260 A280 A260/2 0.980 0.513 1.910 1.653 0.936 1.766

【参考文献】：
期刊论文
[1]pcDNA3.1/hTSHR真核表达载体的构建及其在COS-7细胞中的表达[J]. 詹升华,张徽,刘纯.  细胞与分子免疫学杂志. 2004(04)
[2]甲状腺刺激抗体与Graves病的治疗[J]. 王晓霞,靳毅明,金世鑫.  中国处方药. 2003(03)
[3]Graves病动物模型的研究进展[J]. 贾悦,刘超.  国外医学.内分泌学分册. 2001(04)



本文编号：2982031