肠炎沙门菌YbjX基因缺失株的构建及生物学特性研究

发布时间：2021-01-27 19:57

　　为研究肠炎沙门菌外膜蛋白YbjX对该菌致病作用的影响,本研究利用λ-Red同源重组系统构建了肠炎沙门菌（C50336）YbjX基因缺失突变株（C50336ΔYbjX）,并对其生物学特性进行分析,探究YbjX蛋白在肠炎沙门菌致病过程中的作用。结果显示,缺失株C50336ΔYbjX与野生型菌株和回复菌株相比,其生长速度、生化特性无明显差异,但其在血清中和蛋清中的存活能力明显下降。此外,药敏试验结果表明YbjX基因缺失会引起沙门菌药物敏感性增强。进一步的,动物致病性实验表明,YbjX基因缺失会引起沙门菌毒力和巨噬细胞内存活能力的严重下降。本研究证实YbjX基因与肠炎沙门菌毒力密切相关,为进一步阐释肠炎沙门菌感染致病机制奠定基础。 

【文章来源】：中国人兽共患病学报. 2019,35(04)北大核心

【文章页数】：6 页

【部分图文】：

图１肠炎沙门菌ＹｂＸ基因缺失株的验证Ｍ．ＤＬ２０００ｐｌｕｓＭａｒｋｅｒ；１．Ｃ５０３３６；２．Ｃ５０３３６ＹｂｊＸ：：ｃａｔ；３．Ｃ５０３３６ΔＹｂｊＸ

因缺失菌株和回补菌株等量感染鼠源巨噬细胞Ｒａｗ２６４．７，测定３者在鼠源巨噬细胞内存活能力。结果显示，野生型细菌在Ｒａｗ２６４．７细胞内的增殖率（２３ｈ／３ｈ）达到４０多倍，而对应的ＹｂｊＸ基因缺株在Ｒａｗ２６４．７细胞内的增殖率（２３ｈ／３ｈ）率约２６倍（图３），下降显著（Ｐ＜０．０５）。上述结果表明，ＹｂｊＸ蛋白参与调控肠炎沙门菌在巨噬细胞内的存活和增殖。２．６ＹｂｊＸ基因缺失对肠炎沙门菌血清和蛋清生存图３ＹｂｊＸ基因缺失对肠炎沙门菌Ｃ５０３３６在巨噬细胞Ｒａｗ２６４．７胞内存活的影响Ｆｉｇ．３ＳｕｒｖｉｖａｌａｎａｌｙｓｉｓｏｆＣ５０３３６ｉｓｏｇｅｎｉｃｄｅｌｅｔｉｏｎｓｔｒａｉｎｓｂｙＲａｗ２６４．７ｃｅｌｌｓ的影响将肠炎沙门菌野生型菌株、ＹｂｊＸ基因缺失株及回补菌株与健康鸡血清混合，评测其在血清中生存的影响，结果（图４Ａ）显示，野生型菌株能够在鸡血清中很好的增殖，而ＹｂｊＸ基因缺失株生长速率远低于野生型菌株，回复菌株血清生存能力得到部分恢复。进一步，我们检测了肠炎沙门菌各菌株在蛋清中存活能力。结果表明（图４Ｂ）ＹｂｊＸ基因缺失后肠炎沙门菌在蛋清内的存活能力显著下降，证明ＹｂｊＸ蛋白参与肠炎沙门菌的蛋内存活。２．７ＹｂｊＸ基因缺失对肠炎沙门菌毒力的影响利用小鼠模型测定肠炎沙门菌野生型菌株和ＹｂｊＸ基因缺失株的ＬＤ５０，Ｃ５０３３６和缺失菌株的ＬＤ５０分别为３．９８×１０５和１．４３×１０７ｃｆｕ，表明缺失株毒

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3003639