人次级淋巴组织趋化因子（SLC）的克

发布时间：2021-02-05 22:32

　　次级淋巴组织趋化因子（Secondary Lymphoid-Tissue Chemokine ,SLC）,即CCL21,是趋化因子（Chemokine）超家族成员。SLC通过其受体CCR7诱导T淋巴细胞和DC（dendritic cell）进入次级淋巴组织,并由DC提呈抗原,激活T淋巴细胞。因此SLC是引发特异性免疫反应的关键趋化因子之一。研究表明,缺乏鼠SLC的小鼠其T细胞归巢和DC定位障碍,T细胞活化延迟,次级淋巴组织结构紊乱。而SLC的过表达则密切参与了多种自身免疫性疾病的发生和发展。因此,SLC及其受体有望成为治疗移植排斥反应、自身免疫性疾病和肿瘤药物设计的新靶点。为此我们克隆了人SLC成熟蛋白基因,构建了该基因的原核表达质粒,进行了重组蛋白的诱导表达、纯化及生物学活性的鉴定,旨在为进一步研究SLC在移植排斥反应、肿瘤发展与转移和自身免疫性疾病中的作用机制及应用奠定基础。该项研究取得的主要结果如下:1.通过从人扁桃体中提取总RNA,RT-PCR成功获得编码人SLC成熟蛋白的DNA片段（SLC起始密码子下游第70-405base）,并将该片段插入原核表达质粒pET32a（+）,成... 

【文章来源】：中国人民解放军陆军军医大学重庆市

【文章页数】：65 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

重组质粒pET32a(+)/SLC(＋3)的测序结果(S-Tag引物)

重组质粒pET32a(+)/SLC(＋3)的测序结果(T7引物)

所获 cDNA 序列如下：5’－……..ACCGACGACGACGACAAG -肠激酶位点(Enterkinase site)→SLC 天然蛋白序列AGTGATGGAGGGGCTCAGGACTGTTGCCTCAAGTACAGCCAAAGGAAGATTCCCGCCAAGGTTGTCCGCAGCTACCGGAAGCAGGAACCAAGCTTAGGCTGCTCCATCCCAGCTATCCTGTTCTTGCCCCGCAAGCGCTCTCAGGCAGAGCTATGTGCAGACCCAAAGGAGCTCTGGGTGCAGCAGCTGATGCAGCATCTGGACAAGACACCATCCCCACAGAAACCAGCCCAGGGCTGCAGGAAGGACAGGGGGGCCTCCAAGACTGGCAAGAAAGGAAAGGGCTCCAAAGGCTGCAAGAGGACTGAGCGGTCACAGACCCCTAAAGGGCCATAG－3’经查对，与 GenBank 上登录的编码相应 SLC 天然蛋白的 cDNA 序列完全一致。该序列 GenBank 登录号为 AB002409。测序结果如图 3。

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3019688