人胚骨髓间充质干细胞的增殖、定向分化及转bFGF基因的研究

发布时间：2021-03-02 13:18

　　目的：探索人胚骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cell，MSC）的体外增殖条件和定向分化为多巴胺能神经元的诱导条件；同时，以逆转录病毒为载体，尝试把人bFGF基因转入MSC，为进一步利用MSC进行帕金森疾病的细胞替代治疗和基因治疗提供理论基础。 方法：采用MTT比色法检测不同接种密度、不同浓度的胎牛血清、EGF和PDGF-BB对MSC生长的影响；应用RA、bFGF、FGF-8和BDNF对不同代数的MSC进行诱导，通过细胞免疫荧光和Western blot鉴定诱导后的细胞；构建pLXSN-bFGF病毒质粒，脂质体转染PA317包装细胞，G418筛选，PCR鉴定抗性克隆中bFGF基因的整合情况，制备相应的病毒，感染MSC。 结果：以接种密度为1×10⁴个／ml、加入10％胎牛血清、10ng／ml EGF和10ng／ml PDGF-BB的培养条件最有利于MSC的增殖；MSC经RA诱导后定向分化为不具备多巴胺能神经元表型的神经元样细胞，经bFGF、FGF-8和BDNF诱导后，大部分细胞定向分化为神经元样细胞而非神经胶... 

【文章来源】：暨南大学广东省 211工程院校

【文章页数】：79 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

比较不同浓度的PDGF-BB对MSC生长的影响

图1.6流式细胞术分析不同浓度PDGF一BB作用下MSC的细胞周期A:Controle:sng/mlpnGr一BB作用下Mse的细胞周期rng/mlpDGF一BB作用下Mse的细胞周期long/mlPnGF一BB作用下MsC的细胞周期DB

图1.6流式细胞术分析不同浓度PDGF一BB作用下MSC的细胞周期pnGr一BB作用下Mse的细胞周期rng/mlpDGF一BB作用下Mse的细long/mlPnGF一BB作用下MsC的DB

【参考文献】：
期刊论文
[1]成纤维细胞生长因子研究进展[J]. 金曼林,童坦君.  生理科学进展. 1994(02)



本文编号：3059329