硝苯地平对ApoE -/- 小鼠RAW264.7巨噬细胞源性胆固醇逆向转运的影响

发布时间：2021-03-24 19:50

　　目的探讨硝苯地平对ApoE-/-小鼠RAW264.7巨噬细胞源性胆固醇逆向转运的影响。方法 8周龄左右ApoE-/-小鼠16只,用高脂饲料喂养作为模型,按完全随机分组法分为对照组（n=8）和硝苯地平组（n=8）。将[3H]-胆固醇标记的荷脂RAW264.7小鼠巨噬细胞注入小鼠腹腔,24、48 h时取血液标本,酶法检测血浆总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-c）和高密度脂蛋白胆固醇（HDL-c）的浓度。处死后取小鼠肝脏和小肠,实时定量PCR检测肝脏及小肠ABCA1、ABCG1、SR-BⅠ、LXRα基因的mRNA表达,Western blot检测其蛋白表达。同时,收集48 h小鼠粪便,进行闪烁液计数,分别比较2组[3H]的含量。结果与对照组相比,经硝苯地平处理组血浆血脂蛋白水平均无明显变化（P>0.05）;血浆24、48 h闪烁值较对照组分别增加37.02%、22.72%（P<0.05）,粪便[3H]闪烁值较对照组增加43.18%（P<0.05）;硝苯地平组ABCA1、ABCG1、SR-BⅠ、LXRα基因的mRNA和蛋白的表达均有明显升高。结论... 

【文章来源】：第三军医大学学报. 2014,36(09)北大核心CSCD

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【部分图文】：

ApoE－/－小鼠血浆(A)与粪便(B)中闪烁值比较

喙鼗?騧ＲNA的表达硝苯地平组肝脏与小肠的胆固醇相关转运基因ABCA1、ABCG1、SＲ-BⅠ、LXＲα的表达较对照组均明显增加(P＜0．05，图2)。2．4硝苯地平增强胆固醇逆向转运相关蛋白表达硝苯地平组肝脏与小肠的胆固醇相关转运蛋白ABCA1、ABCG1、SＲ-BⅠ、LXＲα的表达均较对照组明显增加，且肝脏的表达较小肠强(图3)。1234ABCA1（254×103）→ABCA2（76×103）→SR蛳BⅠ（61×103）→LXRα（50×103）→GAPDH（36×103）→1:对照组肝脏;2:硝苯地平组肝脏;3:对照组小肠;4:硝苯地平组小肠图3Westernblot检测硝苯地平对ApoE－/－小鼠ＲAW264．7巨噬细胞源性胆固醇逆向转运相关蛋白表达的影响3讨论胆固醇逆向转运是机体排出过多胆固醇的唯一途径，也是机体抗动脉粥样硬化最重要的机制之一。其主要过程包括将多余的胆固醇经转运体如ATP结合盒转运子A1、G1和清道夫受体B族Ⅰ型(SＲ-BⅠ)等介导从外周细胞流出，转移至HDL，随血液循环至肝脏，与肝细胞表面HDL受体如SＲ-BⅠ结合，被选择性摄取后转变为胆汁酸盐，继而经由粪便排出体外。硝苯地平是一种长效L-型钙通道阻滞剂，可以抑制高血压患者动脉粥样硬化进展。文献［13］研究显示，硝苯地平能减缓ApoE－/－小鼠动脉粥样硬化的发展。载脂蛋白E是清除乳糜微粒和极低密度脂蛋白受体的配体，因此，缺乏ApoE则会导致血液循环中富含胆固醇物质累积而更加容易引起动脉粥样硬化病灶形成。ApoE－/－小鼠是动脉粥样硬化较好的模型。为检测硝苯地平的抗动脉粥样硬化作用是否与增强小鼠ＲAW264．7巨噬细胞的胆固醇逆向转运功能有关，在本研究中，我们以ApoE－/－小鼠为动物模型，采用［3H］同位素法研究动脉粥样硬化病变中胆固醇的逆向转运。


本文编号：3098291