去迷走神经对大鼠再生肝Atf3和Nr2f1表达的影响

发布时间：2017-04-16 09:04

  本文关键词：去迷走神经对大鼠再生肝Atf3和Nr2f1表达的影响，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:研究去迷走神经对大鼠再生肝中Atf3和Nr2f1的表达影响,进一步探讨迷走神经在肝再生过程中的作用及其调控机制。方法:将108只雄性大鼠分为随机的2组:PH组:2/3肝切除组;PHV组:去迷走神经2/3肝切除组。分别在术后0h、2h、12h、24h、36h、48h、72h、120h、168h处死,取大鼠的肝脏并分成两份,一份保存在中性福尔马林试剂中,另一份保存于液氮中。用免疫组织化学方法和免疫印迹法(Western Blot)检测肝组织中Atf3和Nr2f1蛋白的表达;实时荧光定量法(RT-PCR)检测肝组织中Atf3mRNA和Nr2f1 mRNA的表达。结果:(1)免疫组化法检测大鼠再生肝中Atf3的表达:PHV组大鼠在术后24h~36h的阳性表达量明显高于PH组(P0.01),在12h和48h表达量低于PH组。(2)免疫组化法检测大鼠的再生肝中Nr2f1的表达:相对于PH组来说,PHV组大鼠的表达量在术后12h、36h、48h、72h、168h低于PH组,在术后2h、24h、120h处表达量稍高于PH组,36h表达量上升到最高,在术后12h、48h和168h时与PH组有显著性差异(P0.05)。(3)RT-PCR法检测大鼠再生肝组织中Atf3 mRNA的表达结果:与PH组相对比,PHV组的大鼠术后24h~36h肝组织内Atf3 mRNA的表达量上升,且高于PH组,在术后2h、36h和120h有显著性差异(P0.05)。(4)RT-PCR法检测大鼠再生肝组织中Nr2f1 mRNA的表达结果:与PH组相对比,PHV组的大鼠,手术后Nr2f1 mRNA的表达量在0h~168h基本都低于PH组,在术后12h和48h有极显著差异(P0.05)。(5)WB法检测大鼠的再生肝组织中Atf3的蛋白的表达结果:与PH组相对比,PHV组大鼠手术后至48h表达量高于PH组,在48h~120h表达量低于PH组,有显著性差异(P0.05)。(6)WB法检测大鼠再生肝组织中Nr2f1的蛋白表达结果:与PH组相比,PHV组大鼠术后Nr2f1的蛋白量表达变化与PH组的变化相似,但整体都比PH组的表达量低,与PH组相比有显著性差异(P0.01)。结论:(1)研究结果进一步提示去迷走神经可能对大鼠肝组织再生起促进作用。(2)去迷走神经对大鼠肝再生的促进作用,可能是通过促进再生肝组织中Atf3的表达,抑制再生肝组织中Nr2f1的表达来实现的。II
【关键词】：肝再生 去迷走神经 Atf3 Nr2f1
【学位授予单位】：河南师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R329.2
【目录】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-10
• 缩略语表10-11
• 第一章 文献综述11-25
• 1.1 肝脏结构及神经分布11-14
• 1.1.1 肝脏的结构功能11-13
• 1.1.2 大鼠肝脏的神经分布13-14
• 1.2 迷走神经对肝脏的调节作用14-16
• 1.2.1 迷走神经在肝脏中的作用14-16
• 1.2.2 去迷走神经模型的建立16
• 1.3 肝再生的研究现状16-20
• 1.3.1 大鼠肝再生机理16-18
• 1.3.2 雌激素与肝再生18
• 1.3.3 正负因子对肝再生的的调控18-20
• 1.4 肝再生的基因组学20-24
• 1.4.1 相关基因在肝再生不同阶段的表达20-21
• 1.4.2 Atf3与Nr2f1基因的研究现状21-23
• 1.4.3 Atf3和Nr2f1基因与肝再生的关系23-24
• 1.5 本研究的目的和意义24-25
• 第二章 材料与方法25-36
• 2.1 材料25-26
• 2.1.1 实验动物25
• 2.1.2 主要试剂25-26
• 2.1.3 主要手术器械26
• 2.1.4 主要仪器26
• 2.2 动物模型的制备26-28
• 2.2.1 术前准备26-27
• 2.2.2 对照组动物模型建立27
• 2.2.3 实验组动物模型建立27
• 2.2.4 术后处理27-28
• 2.3 免疫组化法检测Atf3和Nr2f1蛋白的表达28-29
• 2.3.1 动物取材28
• 2.3.2 石蜡包埋、制片28
• 2.3.4 免疫组化法检测Atf3蛋白的表达28-29
• 2.3.5 免疫组化法检测Nr2f1蛋白的表达29
• 2.4 RT-PCR法检测Atf3 mRNA和Nr2f1 mRNA的表达29-32
• 2.4.1 动物取材29
• 2.4.2 总RNA提取与纯化29-30
• 2.4.3 cDNA合成与纯化30-31
• 2.4.4 RT-PCR引物设计31
• 2.4.5 RT-PCR反应31-32
• 2.5 Western blot法检测Atf3和Nr2f1蛋白的表达32-35
• 2.5.1 动物取材32-33
• 2.5.2 收集蛋白样品33
• 2.5.3 蛋白含量测定33-34
• 2.5.4 Western blot反应34-35
• 2.6 统计学处理35-36
• 第三章 结果36-45
• 3.1 免疫组织化学法检测再生肝Atf3和Nr2f1蛋白的表达36-38
• 3.1.1 肝切除和去迷走神经再生肝中Atf3蛋白的表达变化36-37
• 3.1.2 肝切除和去迷走神经再生肝中Nr2f1蛋白的表达变化37-38
• 3.2 RT-PCR法检测再生肝Atf3 mRNA和Nr2f1 mRNA的表达38-42
• 3.2.1 Atf3 mRNA和Nr2f1 mRNA的RT-PCR结果38-40
• 3.2.2 肝切除和去迷走神经再生肝中Atf3 mRNA表达变化40-41
• 3.2.3 肝切除和去迷走神经再生肝中Nr2f1 mRNA表达变化41-42
• 3.3 Western blot法检测再生肝Atf3和Nr2f1蛋白的表达42-45
• 3.3.1Western blot结果42-43
• 3.3.2 肝切除和去迷走神经再生肝中Atf3蛋白的表达变化43
• 3.3.3 肝切除和去迷走神经再生肝中Nr2f1蛋白的表达变化43-45
• 第四章 讨论45-49
• 4.1 大鼠去迷走神经对再生肝中Atf3表达的影响45-46
• 4.2 大鼠去迷走神经对再生肝中Nr2f1表达的影响46-49
• 第五章 结论49-50
• 参考文献50-59
• 附录59-65
• 致谢65-66
• 攻读学位期间发表的学术论文目录66-67

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 钱伟,伍忍;交感神经对去迷走神经大鼠胃泌素释放的刺激作用[J];生理学报;1988年04期

2 宋喜秀;;肝脏的功能与常用肝功能检查的临床意义[J];人民军医;1985年04期

  本文关键词：去迷走神经对大鼠再生肝Atf3和Nr2f1表达的影响，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：310455