人源抗-HBs Fab表达系统的转换与制备研究

发布时间：2021-04-28 21:54

　　随着重组抗体技术的发展，人鼠嵌合抗体、人源化抗体在临床的使用已初显成效。治疗用抗体的核心问题是抗体蛋白的完全人源化，以消除用于人体时产生的HAMA反应或其他并发症，而完全的人源抗体完全避免了鼠源成分，是未来临床应用的必要形式。人源抗体得以有效应用的关键在于其低免疫原性以及保留了对抗原的特异性结合的生物学特性，正成为当前研究的热点。 以噬菌体表面呈现技术制备抗体片段，如Fabs或单链Fv，是1990年由McCafferty等最先报道的。通常利用各种噬菌体载体、基因融合技术，连同PCR扩增技术，建立组合抗体文库，再利用供者文库建立针对某一特定抗原的子文库，是近年来形成的最新方法，从而回避了杂交瘤技术和免疫。 人源抗体制备的瓶颈是获得高表达、高产量、高活性抗体。前期的研究表明，以pComb3为载体的抗体片段表达无法避免较高的基础表达，难以达到上述的理想制备。本课题引入了一个新的策略，即以pBAD/gⅢ为载体重新克隆抗—HBs Fab基因。这个系统的主要特点在于①在无诱导剂的条件下，表达水平很低，②存在诱导剂的情况下，获得适度地高表达水平，③调节表达地诱导剂浓度范围很宽，④表达系统... 

【文章来源】：中国人民解放军海军军医大学上海市 211工程院校

【文章页数】：54 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
缩略词表
摘要
    中文摘要
    英文摘要
前言
论文
    第一部分 人源生物工程抗-HBsFab的克隆与表达
        材料与方法
        结果
        讨论
    第二部分 表达和纯化人源抗-HBsFab的条件选择
        材料与方法
        结果
        讨论
    结论
    参考文献
文献综述
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]人源性抗HBsAg单克隆抗体Fab片段的制备及其纯化[J]. 范列英,韩焕兴,胡东平,孔宪涛.  第二军医大学学报. 1997(04)
[2]人源抗HBsAg单克隆抗体组合文库的建立[J]. 韩焕兴,孔宪涛.  中国免疫学杂志. 1996(05)



本文编号：3166239