“促育生精方”调节环磷酰胺致少弱精症模型大鼠精子特异性钙通道CatSper1、CatSper2的机制研究

发布时间：2017-04-20 01:06

  本文关键词：“促育生精方”调节环磷酰胺致少弱精症模型大鼠精子特异性钙通道CatSper1、CatSper2的机制研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的探讨“促育生精方”对环磷酰胺(CP)致少弱精症模型大鼠精子特异性钙通道蛋白Cat Sper1、Cat Sper2的影响,并探讨其调节机制,为该方的临床疗效提供可靠的科学依据。方法将50只雄性、13周龄Wistar大鼠适应性饲养6天,随机分为模型组(MG)、空白对照组(BCG)、低剂量药物组(LDCG)、中剂量药物组(MDCG)、高剂量药物组(HDCG),每组十只。BCG腹腔注射生理盐水;MG、LDCG、MDCG、HDCG腹腔注射CP30mg/(kg·d),共5天。建立大鼠少弱精子症模型后,LDCG、MDCG、HDCG大鼠每天3ml促育生精方免煎颗粒药液灌胃,(低、中、高剂量对映浓度为1.73mg/ml、3.47mg/ml、6.93mg/ml),BCG和MG用生理盐水灌胃,持续30天。末次给药24 h后,迅速取出动物精子标本。光学显微镜检测精子数目、精子活力,用流式细胞仪检测细胞内Ca2+浓度,采用实时荧光定量PCR法检测Cat Sper1 m RNA、Cat Sper2m RNA在各组大鼠精子中的表达;用蛋白免疫印迹法检测Cat Sper1蛋白,Cat Sper2蛋白的表达。结果成功建立少弱精子症大鼠模型。与BCG比较,MG的精子数目、a级、a+b级精子比率,细胞内Ca2+浓度、Cat Sper1 m RNA、Cat Sper2 m RNA及其相应蛋白表达量显著降低(P0.05);与MG比较,各剂量药物治疗组精子数目均增加(P0.05),MDCG、HDCG的a级、a+b级精子比率、细胞内Ca2+浓度、Catsper1 m RNA、Catsper2 m RNA及其相应蛋白表达量显著显著增加(P0.05)。结论促育生精方可以提高环磷酰胺致少弱精症模型大鼠精子数,提高精子尾部鞭毛特异性钙通道Cat Sper1、Cat Sper2基因及其相应蛋白的表达,从而增加细胞内Ca2+浓度,提高精子活率及活力。
【关键词】：促育生精方 环磷酰胺 少弱精症 Cat Sper1 Cat Sper2
【学位授予单位】：青岛大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R285.5;R-332
【目录】：

• 摘要2-3
• Abstract3-6
• 引言6-8
• 第1章 材料与方法8-23
• 1.1 主要仪器设备8-9
• 1.2 实验试剂及材料9-13
• 1.3 实验动物13
• 1.4 药物制备13-14
• 1.5 动物处理14
• 1.6 标本采集14
• 1.7 检测促育生精方对大鼠精子数目、活动力的影响14-15
• 1.8 精子胞浆Ca2+含量测定15
• 1.9 促育生精方对精子CatSper1、CatSper2基因表达影响检测15-19
• 1.10 促育生精方对精子CatSper1、CatSper2蛋白的影响19-22
• 1.11 统计学分析22-23
• 第2章 结果23-34
• 2.1 动物实验23-24
• 2.2 精子检测结果24-26
• 2.3 促育生精方对细胞内Ca~(2+)浓度的影响26-28
• 2.4 促育生精方对精子CatSper1、CatSper2基因表达的影响28-32
• 2.5 促育生精方对精子CatSper1、CatSper2蛋白表达的影响32-34
• 第3章 讨论34-40
• 3.1 促育生精方组成与制剂工艺34-35
• 3.2 动物模型的建立35-36
• 3.3 促育生精方对精子数目与活力的影响36-37
• 3.4 促育生精方对CatSper1、CatSper2基因的影响37-38
• 3.5 促育生精方对CatSper1、CatSper2蛋白的影响38
• 3.6 促育生精方对细胞内Ca2+浓度的影响38-40
• 结论40-41
• 参考文献41-44
• 综述1中医治疗少弱精症的研究进展44-56
• 综述1参考文献53-56
• 综述2 促育生精方质量标准研究56-61
• 参考文献60-61
• 致谢61-62

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前5条

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本文编号：317552