寨卡病毒DNA疫苗新型佐剂的筛选

发布时间：2021-05-11 22:57

　　目的以卡波姆971p辅以国产白喉、百日咳、破伤风灭活疫苗及Poly（I:C）配制成新型佐剂,与DNA疫苗pVAX-Zika-E联合免疫BALB/c小鼠,观察新型卡波姆佐剂对DNA疫苗抗原的适应性及免疫应答能力。方法 PCR扩增ZIKA E蛋白基因,连接到pVAX-1载体上,构建表达ZIKA E蛋白的DNA疫苗。将重组质粒转染至HEK293细胞,采用Western blot检测目的蛋白的表达。用配制的佐剂与表达ZIKA E蛋白的DNA疫苗联合免疫BALB/c小鼠。通过淋巴细胞增殖试验和特异性抗体检测验证新型佐剂的增强免疫效果。结果 Western blot结果显示所构建的DNA疫苗pVAX-ZIKA-E表达56×10³目的蛋白。用重组疫苗做动物试验,免疫35 d时佐剂组淋巴细胞增殖刺激组刺激指数是无佐剂对照组的1.30～1.55倍,特异抗体水平(A₄₅₀值)是无佐剂组对照组的1.27～1.50倍。结论 pVAX-ZIKA-E DNA疫苗辅以新型卡波姆佐剂免疫小鼠可增强机体对该疫苗的免疫应答能力。 

【文章来源】：中国病原生物学杂志. 2019,14(03)北大核心CSCD

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
材料与方法
    1 材料
        1.1 主要试剂
        1.2 细胞、菌株及病毒
        1.3 实验动物
    2 方法
        2.1 ZIKA E基因合成和PCR扩增
        2.2 重组质粒的构建
        2.3 表达ZIKA E蛋白DNA疫苗的构建
        2.4 动物免疫试验
            2.4.1 佐剂配制
            2.4.2 动物分组及免疫
        2.5 统计学方法
结 果
    1 目的基因PCR扩增
    2 重组pVAX-ZIKA-E质粒构建及鉴定
    3 Western Blot 检测ZIKA E蛋白的表达
    4 DNA疫苗联合新型佐剂免疫效果
讨 论


【参考文献】：
期刊论文
[1]寨卡病毒感染动物模型研究进展[J]. 黄燕霞,张萍.  热带医学杂志. 2018(02)
[2]蚊寨卡病毒核酸检测体系的建立与初步应用[J]. 谢甜,罗陆婷,尹庆庆,丁琳,潘怡承,滕萍英,谢郁,刘转转,陈晓光,周晓红.  中国病原生物学杂志. 2017(09)
[3]疫苗佐剂最新研究进展[J]. 周洋,耿兴超,汪巨峰,李波.  中国新药杂志. 2013(01)
[4]口腔鳞状细胞癌细胞TLR3表达及其配体poly（I:C）的诱导凋亡作用[J]. 罗清琼,陈万涛,胡水清,陈福祥.  上海交通大学学报(医学版). 2011(01)



本文编号：3182258