人脐带间充质干细胞对人真皮成纤维细胞增殖和细胞外基质基因表达的影响

发布时间：2021-05-17 07:47

　　目的探讨人脐带间充质干细胞（huc MSCs）对人真皮成纤维细胞（HDFib）增殖与细胞外基质相关基因表达的影响及其可能机制。方法采用II型胶原酶消化法从新生儿脐带中分离制备huc MSCs,用流式细胞术鉴定P₃代huc MSCs表面标记抗原,用油红O染色、茜素红S染色和Masson染色进行间充质干细胞三向分化能力鉴定;随后与P₃代HDFib进行transwell共培养,对照组transwell小室上添加等量培养基,观察24、48和72 h时两组HDFib的细胞形态,CCK8法进行细胞增殖检测,q RT-PCR法测定培养24和48h时HDFib主要细胞外基质蛋白collagenI、elastin、fibronectin、MMP-1和细胞信号转导相关基因PI3K、Akt、p38和caspase3 mRNA表达水平。结果制备获得的hucMSCs呈典型成纤维细胞样并贴壁生长,其表面间充质干细胞标志性抗原CD105、CD90、CD73阳性表达率分别为96.97%、99.75%和99.81%,诱导培养16d后出现明显的成脂、成骨和成软骨细胞特性。huc... 

【文章来源】：中国医药生物技术. 2019,14(03)

【文章页数】：9 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 试剂与耗材
        1.1.2 仪器
    1.2 方法
        1.2.1 hucMSCs的分离培养
        1.2.2 hucMSCs表面抗原检测
        1.2.3 hucMSCs三向分化检测
        1.2.4 Transwell
        1.2.5 细胞增殖检测
        1.2.6 qRT-PCR检测基因
    1.3 统计学处理
2 结果
    2.1 hucMSCs表面抗原鉴定
    2.2 hucMSCs三向分化能力鉴定
    2.3 hucMSCs对HDFib细胞生长及形态的影响
    2.4 hucMSCs对HDFib增殖的影响
    2.5 hucMSCs对HDFib胶原合成基因表达的影响
    2.6 hucMSCs对HDFib增殖和细胞外基质调控相关基因表达的影响
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]程控降温法与二步法对胎盘间充质干细胞冻存效果的影响[J]. 章毅,陈侃俊,李萍,李冉,陈亮,陆薇,伍婷,金魏名.  中国医药生物技术. 2017(06)
[2]人脐带间充质干细胞外泌体免疫调节功能的研究[J]. 刘明,汪劲松,刘沐芸,胡祥,徐军.  中华医学杂志. 2015 (32)
[3]应用骨髓间充质干细胞修复皮肤损伤的研究进展[J]. 曾逃方,辛国华,何勇.  中华临床医师杂志(电子版). 2011(16)
[4]小鼠皮肤切创愈合过程中磷酸化 p38MAPK 表达及其与时间的相关性[J]. 张建军,官大威,杨大利.  法医学杂志. 2007(05)

硕士论文
[1]EGCG抑制UVB及UVA诱导的人皮肤成纤维细胞MMP-1水平及其相关分子机制的实验研究[D]. 潘敏.南京医科大学 2008



本文编号：3191390