兔脂肪组织来源干细胞分离培养方法与鉴定

发布时间：2017-04-23 14:13

  本文关键词：兔脂肪组织来源干细胞分离培养方法与鉴定，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的 建立一种简单高效的兔脂肪组织来源干细胞(adipose-derived stem cells, ADSCs)的体外分离培养方法,使在兔模型中脂肪组织来源干细胞的提取方法更加简便而且高效,为组织工程提供充足的干细胞来源‘。方法兔麻醉后在无菌条件下分离兔腹股沟皮下脂肪组织,剪碎成脂肪颗粒后采用0.1%Ⅰ型胶原酶37℃恒温条件下震荡消化,用含10%胎牛血清(FBS)及1%双抗(青霉素、链霉素)的高糖基础培养基(DMEM)在细胞培养箱中进行贴壁培养兔ADSCs,并对其细胞的形态、体外增殖能力进行观察统计,绘制细胞增殖曲线,并对其经过诱导,对其成骨、成脂肪、成软骨能力的分化及表面标记基因表达进行分析研究。结果此方法在体外分离培养的兔ADSCs具有良好的细胞形态和极强的增殖能力,经诱导分化,其具有成脂。成软骨及成骨分化潜能,兔第三代ADSCs表面标记CD34、CD105阳性,S c a—1高表达,不表达C D 45及SSEA-1。结论利用兔腹股沟皮下脂肪组织,剪碎后经Ⅰ型胶原酶消化,进行贴壁培养的细胞量大、质优,并且既具有良好干细胞特性,又具有极强体外增殖能力,使兔模型中分离和培养脂肪组织来源干细胞的方法更加简便并且高效,为组织工程研究中提供一种优质并且无伦理学问题的种子细胞,并且解决了组织工程中种子细胞需求量大、提取简便的难题。
【关键词】：兔 ADSCs 分化潜能 表面标记 基因表达 组织工程
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R329
【目录】：

• 个人简历3-5
• 中文摘要5-6
• 英文摘要6-8
• 前言8-12
• 参考文献11-12
• 实验材料与方法12-24
• 结果24-33
• 讨论33-39
• 参考文献35-39
• 文献综述39-57
• 参考文献51-57
• 致谢57-58
• 攻读硕士期间论文发表情况58
• 攻读硕士期间参与申请课题58-59
• 附件59-62

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前9条

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本文编号：322533