核受体PPARγ结合小肽的筛选及初步功能鉴定

发布时间：2021-06-12 00:17

　　过氧化物酶体增殖物激活受体（peroxisome proliferator-activated receptors, PPARs）是一类由配体激活的转录因子,属于核受体超家族的成员。PPARs存在三种亚型:PPARα、PPARβ/δ和PPARγ。其中PPARγ可由多种脂肪酸及其代谢产物激活,在机体糖类和脂类代谢中起到重要调节作用,与2型糖尿病、动脉粥样硬化、高血压等多种代谢性疾病以及炎症、肿瘤等的发生密切相关。目前,PPARγ作为多种疾病治疗的一个重要靶分子,正受到越来越多的关注。近年来发展较快的噬菌体肽库筛选技术正广泛应用于小分子药物设计、重组疫苗研制、抗病毒药物筛选及细胞信号传导研究等领域,其筛选的共同点是钓取与蛋白（如抗体,受体,酶）特异性结合的配基。这种筛选功能性短肽的策略对于PPARγ与其作用分子的研究有很大的借鉴意义。本研究表达纯化了PPARγ配体结合域（ligand bind- ing domain, LBD）的his融合蛋白,并以之为靶,从噬菌体肽库中筛选结合PPARγ受体的短肽,对短肽分子进行了初步鉴定,为进一步研究PPARγ作用的分子机理以及开发以PPARγ为作用靶... 

【文章来源】：中国人民解放军陆军军医大学重庆市

【文章页数】：67 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

重组PPARγ-LBD蛋白的SDS-PAGE电泳分析

PPARγ-LBD的纯化结果

图 2 诱导温度对重组蛋白表达的影响诱导前的 pET28a-PPARγ-LBD/Bl21(DE3)；pET28a-PPARγ-LBD/Bl21(DE3)在 37℃诱导 4hr 的表达pET28a-PPARγ-LBD/Bl21(DE3)在 20℃诱导 12hr 的表37℃诱导表达菌超声破碎的上清；37℃诱导表达菌超声破碎的沉淀；20℃诱导表达菌超声破碎的上清；20℃诱导表达菌超声破碎的沉淀；纯化后的重组 PPARγ-LBD 蛋白；小分子量蛋白标准


本文编号：3225555