神经干细胞与雪旺细胞混合培养及其相容性研究

发布时间：2024-11-02 02:06

　　目的：观察小鼠周围神经髓鞘雪旺细胞（Schwann cells，SC）和Wistar大鼠脑源性神经干细胞（Neural stem cells，NSC）体外共培养时两者的相容性，分析SC对NSC的存活、增殖以及分化调控的影响；初步探讨SC对NSC新生轴突髓鞘化的作用以及对各新生神经细胞之间突触建立的影响。 方法：获取出生3d的小鼠坐骨神经和臂丛神经，采用组织块法分离、培养SC，一周后采用双30分钟差速贴壁粘附离心法纯化SC，去除培养细胞内的成纤维细胞及其他细胞并扩大培养；3周后进行S100免疫组化鉴定。取新生1天的Wistar大鼠，体外分离鼠脑NSC，采用常规悬浮细胞培养法培养NSC，对第一代和培养3代后的NSC进行Nestin免疫组化染色鉴定。然后进行小鼠SC与大鼠NSC的混合培养，混合培养分为5组进行：实验组Ⅰ：NSC悬浮+SC悬浮+DMEM／F12；实验组Ⅱ：NSC悬浮+SC贴壁+DMEM／F12；对照组Ⅰ：SC培养基+NSC+DMEM／F12；对照组Ⅱ：EGF／bFGF+NSC+DMEM／F12；对照组Ⅲ：NSC+DMEM／F12+EGF。各组按照常规细胞培...

【文章页数】：50 页

【学位级别】：硕士

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目录
摘要
    1 中文摘要
    2 Abstract
前言
材料和方法
    1 实验材料和器械
        1.1 细胞培养基
        1.2 手术器械
        1.3 实验动物
    2 实验方法
        2.1 小鼠SC的分离、培养、纯化与鉴定
        2.2 乳鼠NSC的培养、纯化、诱导分化与鉴定
        2.3 小鼠SC与大鼠NSC的混合培养
结果
    1 小鼠SC的原代培养
    2 Wistar大鼠脑NSC的培养
    3 共培养结果
讨论
小结
参考文献
综述 脊髓损伤与自身免疫的研究进展
致谢
附图



本文编号：4008849