利用黑斑双鳍电鳐构建实验性自身免疫性重症肌无力小鼠模型

发布时间：2021-06-14 08:20

　　目的建立符合国际化的临床前实验标准的实验性自身免疫性重症肌无力（experimental autoimmune myasthenia gravis, EAMG）动物模型。方法参照文献报道的方法并改进后,从电鳐电器官提取乙酰胆碱受体（acetylcholine receptor,AchR）蛋白纯品,并采用SDS凝胶电泳蛋白定性鉴定及BCA法蛋白定量;用纯化的蛋白主动免疫C57BL/6小鼠,共免疫3次（分别于第1天、第30天、第60天）,进行EAMG小鼠临床评分、体重、血清AchR抗体含量、新斯的明试验、肌电图等综合评价。结果 EAMG模型组与佐剂组比较,自第三周开始发病,平均临床评分显著上升（P<0.01）;发病小鼠体重显著减轻（P<0.01）;新斯的明试验阳性;血清AchR抗体含量明显增加（P<0.01）;肌电图重复电刺激实验阳性。结论从黑斑双鳍电鳐的电器官提取、纯化AchR蛋白成功诱导C57BL/6 EAMG小鼠模型,为进一步研究重症肌无力创造了良好条件。 

【文章来源】：中国实验动物学报. 2019,27(02)北大核心CSCD

【文章页数】：5 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 实验动物
        1.1.2 实验试剂
        1.1.3 实验仪器
    1.2 方法
        1.2.1 AchR的提取
        1.2.2 中华眼镜蛇毒亲和层析柱制备及纯化AchR蛋白
            (1) 中华眼镜蛇毒亲和层析柱制备
            (2) 制备羟基磷灰石柱子
            (3) 亲和纯化AchR蛋白
        1.2.3 SDS-PAGE分析
        1.2.4 EAMG 模型制备及评价
            (1) EAMG 模型制备
            (2) EAMG评价及检测方法
    1.3 统计学方法
2 结果
    2.1 临床评分
    2.2 体重
    2.3 血清中抗AchR抗体
    2.4 肌电图
    2.5 新斯的明试验
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]重症肌无力小鼠模型的建立[J]. 陈国江,王建安,韩根成,王仁喜,宋伦,池木根,沈倍奋,黎燕.  中国实验动物学报. 2006(01)
[2]黑斑双鳍电鳐（Narcine maculata）电器官ACh受体的分离、纯化及其某些特性的研究[J]. 陈丽筠,沈国光.  动物学研究. 1984(02)



本文编号：3229432