酵母表达的MIP-2γ/GM-CSF融合蛋白的生物学功及其相关机制研究

发布时间：2021-06-29 15:37

　　目的:制备新型MIP-2γ/GM-CSF细胞因子融合蛋白,研究其生物学功能。方法:通过基因工程方法构建高表达MIP-2γ/GM-CSF融合蛋白的酵母工程菌株,并优化发酵、纯化条件。以MTT法和集落形成实验检测MIP-2γ/GM-CSF融合蛋白在体外的促造血增殖活性;以transwell体系检测融合蛋白对免疫造血细胞的趋化活性。进行动物体内实验,研究MIP-2γ/GM-CSF融合蛋白对放疗引起的造血损伤的修复作用和对荷瘤小鼠的抗肿瘤效应,并研究了其相关的作用机制。结果:制备了足量的符合生物学功能实验要求的MIP-2γ/hGM-CSF融合蛋白、MIP-2γ/mGM-CSF融合蛋白。体外实验证实MIP-2γ/GM-CSF融合蛋白具有比单用组成因子MIP-2γ或者GM-CSF更强的促造血增殖活性和对免疫细胞的趋化活性。动物体内实验表明,MIP-2γ/GM-CSF融合蛋白对放疗引起的造血损伤具有更显著的治疗作用,此外,MIP-2γ/GM-CSF融合蛋白还具有一定的抗肿瘤效应。研究中还首次发现了MIP-2γ能够抑制血管生成的新功能。结论:MIP-2γ/GM-CSF融合蛋白具有促进造血恢复和增强免疫... 

【文章来源】：中国人民解放军海军军医大学上海市 211工程院校

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【学位级别】：博士

【部分图文】：

人MPI一YZPCR的产物的电泳分析

军医大学博士学位论文第一部分(二)实验结果1.PCR克隆人Mlp·2丫、hGM·CSF、mGM·CSF基因序列的鉴定反应产物行2%琼脂糖凝胶电泳分析，如图3、4、5所示，PCR反应分别扩增到了270bp、400bp、37obp左右的片段，与设计一致。

R的产物的电泳分析stofhMIP一勿图4人GM一csFig.4PCRProdMarker;1.DGL2000hM护一勿rfagment2.AlllPlified


本文编号：3256701