大鼠骨髓间充质干细胞分离、体外培养和软骨细胞表型定向分化的实验研究

发布时间：2021-06-30 18:51

　　目的：探讨研究分离骨髓间充质干细胞（MSCs）并诱导其向软骨细胞转化的体外培养方法，同时从组织形态学对MSCs生长特征进行观察，为软骨组织工程的种子细胞来源提供实验依据。 方法：抽取大鼠四肢骨髓，Percoll梯度分离液离心分离结合贴壁筛选法得到MSCs，在含15％FBS的低糖DMEM培养液中，置于37℃，5％CO2培养箱内培养10-14d。传代后以15％FBS的高糖DMEM培养液(含地塞米松10^-7mol／L，VitC50ug／ml)对其进行诱导培养。观测在体外培养条件下MSCs的形态、生长特点和诱导培养后软骨特异性基质的表达情况。 结果：1、分离获取了较高纯度的MSCs，保持了细胞的活性。2、MSCs原代培养呈均匀分布的集落样生长，呈长梭形；传代培养中形态特性无明显变化，细胞均质性明显提高。3、各代培养中碱性磷酸酶染色均呈阴性；诱导后的细胞由梭形向多角形、多边形转变，对甲苯胺蓝呈现强的异染性反应，11型胶原免疫组化阳性。 结论：1、采用Percoll梯度分离液离心分离结合贴壁筛选法可获得较高纯度和活性的MSCS，是简便有效、实用可行的方法。2... 

【文章来源】：广西医科大学广西壮族自治区

【文章页数】：62 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
一、 大鼠骨髓间充质干细胞分离、体外培养和向软骨细胞表型定向分化的实验研究
    1 、 中文摘要
    2 、 英文摘要
    3 、 前言
    4 、 材料与方法
    5 、 结果
    6 、 附录(图)
    7 、 讨论
    8 、 结论
    9 、 参考文献
    10 、 致谢
二、 骨髓间充质干细胞及其在软骨组织工程中的研究进展
    1 、 骨髓间充质干细胞
    2 、 骨髓间充质干细胞的生物学特点
    3 、 骨髓间充质干细胞的体外分离纯化、培养扩增
    4 、 骨髓间充质干细胞向软骨表型的定向分化
    5 、 骨髓间充质干细胞介导的组织工程软骨构建及软骨缺损的修复
    6 、 存在问题及展望
    7 、 参考文献


【参考文献】：
期刊论文
[1]诱导骨髓间充质干细胞表达软骨细胞表型[J]. 尹战海,刘淼,王金堂,曹峻岭,郑钧.  中国矫形外科杂志. 2002(06)
[2]骨髓间充质干细胞在软骨细胞培养条件下生物学特点的观察[J]. 周强,李起鸿,杨柳,段小军.  第三军医大学学报. 2002(05)
[3]骨髓间质干细胞向软骨细胞表型定向诱导分化的实验研究[J]. 夏万尧,商庆新,徐蓉,曹谊林,崔磊,丁小邦.  中华整形外科杂志. 2002(01)
[4]自体骨髓基质细胞与同种异体脱钙骨基质复合移植修复关节软骨缺损的实验研究[J]. 丁元洪,张功礼,禹志宏,邓长康,刘宝山,施永彦,李伟,张昊.  实用医学杂志. 2001(10)
[5]兔骨髓间质干细胞用于构建组织工程软骨组织的初步报告[J]. 单玉兴,刘一,徐莘香.  中国修复重建外科杂志. 2001(01)
[6]骨髓基质细胞体外增殖后移植修复关节软骨缺损的实验研究[J]. 董启榕,戴涟生,郑祖根.  中国矫形外科杂志. 2000(10)
[7]人胚胎骨髓基质细胞的体外培养观察[J]. 苏瑞军,黄绍良,周敦华,李树浓,梁晓燕.  中国小儿血液. 1999(01)



本文编号：3258292