果蝇吸入麻醉药敏感性相关基因的筛选和克隆

发布时间：2021-07-03 07:47

　　全麻药物主要是通过直接作用于中枢蛋白质靶位而发挥麻醉作用,其全麻敏感性也由基因所控制,且可稳定遗传。所以可从生物表型差异着手,采用遗传筛选获得对全麻药物敏感程度不同的生物品系,通过寻找敏感生物与非敏感生物之间基因表达的差异,以探索改变麻醉敏感性的基因产物,从而有可能在整体生物上发现与全麻药物敏感性相关的基因及其相应的转录产物,其中可能包含了全麻作用的特异性分子靶位。 在本研究中,我们采用对七氟醚敏感（S）和耐药（R）的果蝇品系（由华西医科大学麻醉与危重病医学教研室刘进教授惠赠）为研究模型,以野生型黑腹果蝇（Drosophilamelanogaster , H ） 为 对 照 , 应 用 抑 制 性 消 减 杂 交 （ suppression subtractivehybridization,SSH）方法,筛选了与吸入麻醉药七氟醚敏感性相关的候选基因（EST）。 筛选到的敏感性相关基因主要包括以下四种类型: 1、 与脂质代谢有关的敏感性相关基因。如位于 3R:96B10 上的 Osbp,其编码产物参与胆固醇的代谢;位于 X:13A9 的 CG33178,其编码产物可调节转移酶活性... 

【文章来源】：中国人民解放军海军军医大学上海市 211工程院校

【文章页数】：80 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

线虫类与人类全麻观察指标的比较

三、与放射状散布指标相关的全麻敏感基因作为全麻观察指标采用放射状散布作为全麻观察指标，Swinderen BV 等从重组的近交系线虫中筛选出氟烷和异氟醚抗性品系，其 EC50 值为野生型的 4～13 倍，进一步通过与已知标记基因进行染色体连锁分析，初步确定其敏感性相关基因位于 5 号染色体的中间区域；而从已知神经元蛋白基因突变的线虫品系中，筛选到 Syntaxin 基因（unc-64）突变的 md130 品系图 5 野生型和突变型（md130）线虫对吸入麻醉药敏感性的比较野生型线虫，其异氟烷和氟烷的 EC50 值分别为 0.74%和 0.45%突变型（md130）线虫，其异氟烷和氟烷的 EC50 值分别为 4.36%和 1.29%

三、与放射状散布指标相关的全麻敏感基因作为全麻观察指标采用放射状散布作为全麻观察指标，Swinderen BV 等从重组的近交系线虫中筛选出氟烷和异氟醚抗性品系，其 EC50 值为野生型的 4～13 倍，进一步通过与已知标记基因进行染色体连锁分析，初步确定其敏感性相关基因位于 5 号染色体的中间区域；而从已知神经元蛋白基因突变的线虫品系中，筛选到 Syntaxin 基因（unc-64）突变的 md130 品系

【参考文献】：
期刊论文
[1]荧光差异显示PCR分离果蝇七氟醚敏感性相关基因[J]. 刘红,任笑蒙,陈兰英,刘进.  中国生物化学与分子生物学报. 2003(06)
[2]吸入麻醉药全麻敏感基因的研究现状[J]. 曹云飞,孙玉明,俞卫锋.  第二军医大学学报. 2003(09)
[3]野生型与七氟醚敏感型果蝇中枢神经元钾电流的研究[J]. 尹毅青,薛玉良,刘进.  中华麻醉学杂志. 2001(11)
[4]决定七氟醚敏感性的基因在果蝇常染色体的定位研究[J]. 金传刚,肖军,田玉科,毕好生,刘进.  中华麻醉学杂志. 2000(08)
[5]黑腹果蝇对七氟醚敏感品系和耐药品系的建立[J]. 叶其泉,梁效安,刘进,代灼华,杜洪印,邹存梅.  中华麻醉学杂志. 2000(01)



本文编号：3262186