聚乙二醇化重组人生长激素的制备、纯化、理化性质以及生物活性研究

发布时间：2021-08-11 07:00

　　目的:研究单甲氧基聚乙二醇丙醛（mPEG-ALD,20KD）修饰重组人生长激素（rhGH）的最适反应条件以及修饰产物的纯化方法;并以目标产物——单聚PEO-rhGH为研究对象,对其相对分子量、纯度、等电点、修饰位点、二级结构、分子构象、体外受体亲和力以及体内生物学活性进行了研究。方法:用SDS-PAGE分析不同反应条件对修饰反应产物的影响;用离子交换及分子筛进行分离纯化;通过分子筛高效液相（Size Exclusion HPLC）、毛细管等电聚焦（CIEF）、圆二色谱（CD）、质谱、以及荧光光谱等方法对单聚PEG-rhGH的纯度、等电点、二级结构、相对分子量、修饰位点以及分子构象进行了研究;采用妊娠兔肝细胞膜放射受体分析法（RRA）检测单聚PEG-rhGH的体外受体亲和力;利用未成年去垂体大鼠体重增加法检测单聚PEG-rhGH的体内生物活性。结果:通过筛选,选定pH6.0,rhGH与mPEG-ALD质量比1:8,反应时间16h为最佳修饰条件。在此条件下,单聚PEG-rhGH的比例可达77.8%;经两步分离纯化,目标产物单聚PEG-rhGH的得率达到52.9%。样品在分子筛高效液相图谱上... 

【文章来源】：安徽大学安徽省 211工程院校

【文章页数】：48 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

单聚PEG一hrGH质谱扫描图


本文编号：3335699