细粒棘球绦虫重组GST蛋白的原核表达及生物信息学分析

发布时间：2021-08-12 15:14

　　目的原核表达细粒棘球绦虫（Echinococcus granulosus,Eg）谷胱甘肽S-转移酶（Glutathione S-Transferase,GST）蛋白,分析其结构与功能特点。方法将EgGST基因亚克隆于PET-28b表达载体,转化至大肠埃希菌BL21中,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导蛋白表达;蛋白经Ni柱纯化后,用SDS-PAGE及Western-blot进行鉴定;并运用DNAstar软件及在线软件预测分析其结构与功能特点。结果重组EgGST蛋白以可溶性形式在大肠埃希菌中高效表达,其相对分子质量为45 000;该蛋白潜在B细胞表位区域为aa 26～33,89～97,116～124,147～158,201～215;潜在T细胞表位区域为aa 12～20,122～120,79～87,61～69,29～37,62～70。结论成功获得可溶性重组EgGST蛋白,该蛋白具有一定的免疫原性,具有成为细粒棘球蚴病疫苗分子潜力。 

【文章来源】：中国预防医学杂志. 2019,20(07)CSCD

【文章页数】：4 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 试剂与仪器
    1.2 重组质粒的构建
    1.3 重组质粒转化、蛋白诱导表达及可溶性分析
    1.4 重组蛋白纯化
    1.5 SDS-PAGE及Western blot分析
    1.6 二级结构和三级结构预测
    1.7 B细胞表位和T细胞表位预测
2 结 果
    2.1 重组EgGST蛋白的诱导表达、纯化及鉴定
    2.2 EgGST二级结构
    2.3 EgGST三级结构
    2.4 EgGST的B细胞表位
        2.4.1 DNAstar软件预测
        2.4.2 ABCpred网站预测
    2.5 EgGST的T细胞表位
3 讨 论


【参考文献】：
期刊论文
[1]单克隆抗体表位分析技术的研究进展[J]. 赵晓瑞,毛晓燕.  中国生物制品学杂志. 2018(05)
[2]棘球蚴病药物治疗的研究进展[J]. 徐硕,党志胜,张皓冰,胡薇,赵玉敏.  中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 2018(03)
[3]西藏自治区儿童棘球蚴病患病情况及影响因素分析[J]. 薛垂召,伍卫平,韩帅,郑灿军,王莹,王立英,余晴,张山山,周晓农,肖宁,曹建平,贡桑曲珍,曹淳力,田添,陈伟奇,严信留.  中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 2018(01)
[4]我国包虫病基础研究现状及存在的问题[J]. 李润乐,格日力.  中国高原医学与生物学杂志. 2017(04)
[5]青藏高原地区犬棘球绦虫感染的流行病学特征[J]. 刘辉,肖宁,杨诗杰,王东,彭佳.  中国血吸虫病防治杂志. 2017(02)
[6]包虫病的治疗研究进展[J]. 孙艳红,杨亚明.  热带病与寄生虫学. 2015(01)
[7]生物信息学技术在病原生物学中的应用[J]. 高洁,张雷.  中国病原生物学杂志. 2015(01)
[8]谷胱甘肽S-转移酶的研究进展[J]. 陈秀华,王臻昱,李先平,朱延明,刘丽,陈威,陈勤.  东北农业大学学报. 2013(01)
[9]细粒棘球蚴谷胱甘肽s-转移酶重组抗原的高效融合表达、纯化及免疫特性的研究[J]. 李宗吉,黄瑾,张静,张焱,王洁,王淑静,高岭,赵巍.  中国人兽共患病学报. 2007(01)



本文编号：3338557