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制备炭疽芽胞杆菌检测基因芯片的初步研究

发布时间:2021-08-14 02:37
  建立制备炭疽芽胞杆菌检测基因芯片的技术 ,并探讨研制检测炭疽芽胞杆菌基因芯片的方法。酶切炭疽芽胞杆菌的毒素质粒和荚膜质粒 ,通过建立质粒DNA文库的方法获取探针 ,并打印在经过氨基化修饰的玻片上 ,制成用于炭疽芽胞杆菌检测的基因芯片。收集了 2 90个阳性克隆探针 ,制备了检测炭疽芽胞杆菌的基因芯片。提取炭疽芽胞杆菌质粒DNA与基因芯片杂交 ,经ScanArrayLite芯片阅读仪扫描得到初步的杂交荧光图像。通过分析探针的杂交信号初步筛选出 2 73个基因片段作为芯片下一步研究的探针 

【文章来源】:微生物学报. 2004,(03)北大核心

【文章页数】:5 页

【部分图文】:

制备炭疽芽胞杆菌检测基因芯片的初步研究


炭疽芽胞杆菌基因芯片的点阵图

电泳图,琼脂糖凝胶电泳,T载体,质粒


将毒素质粒pX01和荚膜质粒pX02 DNA的限制性酶切产物克隆到T载体后,转化大肠杆菌,然后以T载体上的引物SO100、SO101进行PCR扩增鉴定,以2%的琼脂糖凝胶电泳,得到大小不等的片段,从电泳图可见大多数扩增条带单一清晰,大小多数在250~1000bp范围内,可选择作为基因芯片的探针(图2)。

电泳图,琼脂糖凝胶电泳,T载体,质粒


将毒素质粒pX01和荚膜质粒pX02 DNA的限制性酶切产物克隆到T载体后,转化大肠杆菌,然后以T载体上的引物SO100、SO101进行PCR扩增鉴定,以2%的琼脂糖凝胶电泳,得到大小不等的片段,从电泳图可见大多数扩增条带单一清晰,大小多数在250~1000bp范围内,可选择作为基因芯片的探针(图2)。

【参考文献】:
期刊论文
[1]基因芯片技术检测环境中常见致病菌的初步研究[J]. 靳连群,李君文,王升启,晁福寰,王新为.  中华微生物学和免疫学杂志. 2003(01)
[2]利用基因芯片技术筛选HIV-1F亚型基因限制性显示探针[J]. 李凌,马文丽,祝骥,石嵘,郑文岭.  中国生物化学与分子生物学报. 2002(05)



本文编号:3341601

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