烟酰胺单核苷酸腺苷酰转移酶1对慢性帕金森病小鼠模型黑质中TH及Caspase3蛋白表达的影响
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【摘要】:目的探讨烟酰胺单核苷酸腺苷酰转移酶1(NMNAT1)对慢性帕金森病(PD)小鼠模型(C57BL/6小鼠)黑质中酪氨酸羟化酶(TH)及半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3(caspase-3)表达的影响。方法利用重组慢病毒转染1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)制备的慢性PD小鼠模型。依据不同处理方式分为3组:对照组[经立体定位仪向小鼠双侧黑质注射空白对照重组慢病毒(LV-GFP),1周后腹腔注射生理盐水];MPTP组(经立体定位仪向小鼠双侧黑质注射LV-GFP,1周后建立MPTP慢性PD模型);NMNAT1组[经立体定位仪向小鼠双侧黑质注射NMNAT1基因的过表达重组慢病毒(LV-NMNAT1),1周后建立MPTP慢性PD模型]。采用Western blot法检测3组小鼠黑质中TH及caspase-3蛋白半定量表达水平。结果NMNAT1呈高表达的NMNAT1组小鼠黑质中TH蛋白表达量较MPTP组高(t=7.985,P0.001),caspase-3蛋白表达量较MPTP组低(t=8.901,P0.001)。结论NMNAT1能增加TH表达发挥一定的神经保护作用,并通过减少caspase-3表达水平参与抗细胞凋亡。
【关键词】:酰胺单核苷酸腺苷酰转移酶1 帕金森病 细胞凋亡 酪氨酸羟化酶 半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3
【学位授予单位】:青岛大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R742.5;R-332
【目录】:
- 摘要2-3
- Abstract3-5
- 引言5-6
- 材料与方法6-11
- 1 实验动物及动物分组6
- 2 MPTP慢性PD小鼠模型建立及评价6
- 3 慢病毒注射6-7
- 4 实验标本取材7
- 5 黑质酪氨酸羟化酶染色7-8
- 6 免疫印迹法检测小鼠黑质中TH蛋白、Caspase-3 蛋白的表达8-10
- 7 统计学处理10-11
- 实验结果11-16
- 1 小鼠行为学观察11
- 2 重组慢病毒在小鼠黑质中的表达11-12
- 3 各组小鼠黑质中TH阳性的多巴胺能神经元计数12-13
- 4 NMNAT1 增加PD模型小鼠黑质TH蛋白表达,降低caspase-3 蛋白表达13-16
- 讨论16-18
- 结论18-19
- 参考文献19-21
- 综述21-26
- 参考文献24-26
- 攻读学位期间的研究成果26-27
- 缩略词表27-28
- 致谢28-29
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