肠出血性大肠杆菌O157：H7（EHEC O157：H7）基因工程双亚单位融合蛋白疫苗的实验研究

发布时间：2021-10-21 21:40

　　肠出血性大肠杆菌（EHEC）O157：H7是一种重要的新发传染病病原菌。自1975年被首次分离、1982年被确认为致病菌以来的20多年中，世界各地包括中国都有不同规模的暴发流行。EHEC O157：H7感染可使人患腹泻、出血性结肠炎（hemorrhagic colitis, HC），还可在5～10％的病例中引发溶血性尿毒综合征（hemolytic uremic syndrome, HUS）及血栓性血小板减少紫癜（thrombotic thrombocytopenic purpura, TTP）等严重并发症，严重者可导致死亡。EHEC O157的感染因具有暴发流行趋势、强烈的致病性与致死性和抗生素治疗可加剧病情的危险性等特点，已经成为全球性的公共卫生问题。目前EHEC O157：H7的全基因组测序已经完成，但对其感染仍缺乏有效的防治方法，研究证明：抗生素可促使O157菌释放致死性志贺毒素（Stx），从而使患者并发HUS的危险性增加。人类同传染病斗争的历史表明，疫苗是人类战胜传染病的有力武器。由于O157的暴发流行和治疗上的困难，疫苗研究就显得尤其紧迫。 O157：H7及其它出血性大... 

【文章来源】：中国人民解放军陆军军医大学重庆市

【文章页数】：97 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

一阴离子交换柱层析纯化包涵体的SDS一PAGE分析

第三军医大学硕士学位论文索序列一致。测序报告见附图2，测序结果如下:ATGGGCAI，GAAGAAGATGTTTATGGCGGTTTTATTTGCATTAGCTTCTGTTA户a，GCAATGGCGGCGGArTGTGCTAAAG咤.ATAAI，GAGGATGACACAI，TTACAGTGAAGGTTGACGGGAAAGAAI，CTGCAACCGTTACTGCAAAGTGCTCAGTTGACAGGAAI，GJ诙CCTGTGAAI

二、stxZb基因pMD18一丁重组质粒的酶切鉴定pMD18一T重组质粒经Ncol+N甘‘I双酶切后，目的片段大小约3O0bP，载体片段大小与pMD18一T空质粒单酶切产物一致，初步说明stxZb重组成功，如图3一2所示。阳性重组质粒命名为pMD18一stxZb。1234PMD18一TdigestedbyNcol2一3:PMD18一stxZbdoubledigestedbyNcolandNdel4:100bPDNAladder们。arker重组质粒酶切鉴定PP﹄七七叩甲，‘00000b肠3-:5000]，二，二5，二牙二Fig3一2IdentifieationofreeombinantPlas而ds三、重组质粒pET28。(+)一st、Zb一eaeC3OO的鉴定重组质粒PET28a(+)一stxZb一eaeC3oo分别用Ncol+N汉‘I、Ndel+Xhol和双酶切后，进行1.0%琼脂糖凝胶电泳(图3一3所示)，显示目的条带依次为:900bp、1200bp，与实验设计的酶切片段大小相符，初步证实为重组克隆。12345678Ncol+Xhol300bP、l姗韶900bP500bP300bP100bP1.2:reeombinantPlas而dPET28a(+)一stxZb一eaeC300doubledigestedbyNcol+入以亡L(300bP)3.6:l0()bPDNAladdermarker4.5:reeombinant

【参考文献】：
期刊论文
[1]O157:H7大肠杆菌流行病学研究概况[J]. 汪华,史智扬.  江苏卫生保健. 2001(01)
[2]大肠杆菌O157:H7感染的病原学与流行病学[J]. 李升团,韩光红.  解放军预防医学杂志. 1997(05)



本文编号：3449763