恒河猴表皮干细胞及牙髓干细胞牙向分化的研究

发布时间：2017-05-06 21:06

  本文关键词：恒河猴表皮干细胞及牙髓干细胞牙向分化的研究，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：牙齿的发生是上皮和间充质相互作用的结果,那么构建生物工程牙齿也需要上皮和间充质组织的共同参与。2000年,Gronthos将人牙髓干细胞与HA/TCP支架孵育培养后,移植到裸鼠皮下可形成牙髓／牙本质复合体样结构。另外2010年,Wang等从包皮中分离的表皮干细胞与小鼠E13.5天的磨牙间充质重组之后,可以发育形成一颗具有完整功能形态的牙齿。这一研究发现使得利用表皮干细胞、牙髓干细胞作为牙齿再生的种子细胞而备受重视。恒河猴是在进化上与人相近的灵长类动物,是基础研究走向临床首选的动物模型。虽然Rong Lu等已经成功分离恒河猴表皮干细胞,Huan等也已成功分离恒河猴牙髓干细胞。但对其在牙齿再生应用上的研究鲜有报道。因此对恒河猴表皮干细胞和牙髓干细胞牙向分化的进行研究具有重要意义。本研究选取恒河猴胚胎时期第7—8周,9-10周,11-12周的牙胚作为研究对象,HE染色后观察其组织形态。发现第7-8周的牙胚处于蕾状到帽状的过渡时期,第9-10周的牙胚处于钟状期,第11-12周的牙胚处于分化期。同时还检测了PITX2, FGF8, MSX1在这些时期的表达情况,结果显示PITX2, FGF8, MSX1在这些时期的恒河猴牙胚中或多或少都有表达。本研究成功分离恒河猴表皮干细胞,并将第二代的恒河猴表皮十细胞与小鼠E13.5间充质重组之后,嵌合体发育形成具有完整功能形态的牙齿。同时本实验也成功分离恒河猴牙髓干细胞,并证实其具有成脂成骨以及成牙分化潜能。这些证明了恒河猴表皮干细胞以及恒河猴牙髓干细胞均可作为种子细胞,实现牙齿再生。为利用干细胞重组实现牙齿再生从研究阶段跨越到临床应用阶段做铺垫。
【关键词】：表皮干细胞 牙髓干细胞 牙齿再生
【学位授予单位】：福建师范大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R329.2
【目录】：

• 中文摘要2-3
• Abstract3-5
• 中文文摘5-10
• 绪论10-20
• 1. 牙齿发育10-15
• 1.1 哺乳动物的牙齿发育过程10-11
• 1.2 哺乳动物牙齿发育的分子机制11-15
• 2. 组织工程牙齿再生的研究15-18
• 2.1 表皮干细胞的研究16-17
• 2.2 牙髓干细胞的研究17
• 2.3 其他可用于牙齿再生种子细胞的研究17-18
• 3. 哺乳动物牙齿发育诱导潜能研究18-19
• 4. 研究意义19-20
• 第一章 材料与方法20-34
• 1.1 材料20-25
• 1.1.1 实验动物20
• 1.1.2 实验仪器20-21
• 1.1.3 实验试剂21-24
• 1.1.4 试剂配制24-25
• 1.2 实验方法与步骤25-34
• 第二章 结果34-48
• 2.1 恒河猴牙胚发育分化34-37
• 2.1.1 不同时期恒河猴牙胚的组织学形态34-35
• 2.1.2 一些牙齿发育相关基因在恒河猴牙胚的表达情况35-37
• 2.2 恒河猴表皮干细胞牙向分化的研究37-42
• 2.2.1 恒河猴表皮干细胞在恒河猴皮肤中的定位37-39
• 2.2.2 恒河猴表皮干细胞的分离培养39
• 2.2.3 恒河猴表皮干细胞的鉴定39-40
• 2.2.4 嵌合体牙齿组织形态的观察及鉴定40-42
• 2.3 恒河猴牙髓干细胞的分离培养及其特性研究42-48
• 2.3.1 恒河猴牙髓干细胞的分离培养42-43
• 2.3.2 恒河猴牙髓干细胞的鉴定43-45
• 2.3.3 恒河猴牙髓干细胞多向分化潜能研究45-48
• 第三章 分析与讨论48-54
• 3.1 恒河猴牙胚发育分化48-49
• 3.2 恒河猴表皮干细胞牙向分化的研究49-50
• 3.3 恒河猴牙髓干细胞的分离培养及其特性研究50-54
• 第四章 结论54-56
• 附录156-58
• 参考文献58-64
• 攻读学位期间承担的科研任务与主要成果64-66
• 致谢66-68
• 个人简历68-72

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