Ginkgolide B对低氧时大鼠海马脑片内源性神经递质释放的影响

发布时间：2022-01-12 14:13

　　背景 低氧是描述组织氧供不足的通用术语。低氧条件下，作为神经细胞执行其功能活动和神经元之间主要通讯方式的神经递质和一些信使分子参与了低氧致损神经元的过程。已知细胞膜脂质代谢过程的产物之一PAF在脑组织血供和氧供不足时水平明显升高。研究者们在筛选和寻找防治缺血缺氧性脑损伤的过程中，已经确实证明了天然银杏叶的组分之一Ginkgolide B是一种强有力的高特异性天然PAF受体拮抗剂，可与位于突触前膜的特异性PAF受体结合。因此，Ginkgolide B的神经保护作用很可能或至少部分是由于它可以与突触前膜的PAF受体结合而抑制谷氨酸等神经递质的释放。已有较多的在体实验研究证实了Ginkgolide B具有对抗神经元损伤的作用，但迄今很少有其具有直接的神经保护作用的证据。另一方面，目前关于Ginkgolide B对某些神经递质的释放有作用的研究报道大多基于某些脑区或核团中神经递质总含量即静态含量的测定，鉴于细胞外液和突触间隙中兴奋性氨基酸浓度过度增高和Ca²⁺参与的受体过度激活被普遍认为是造成神经元死亡的“最后公路”，神经递质的静态总含量的测定事实上很难反映细胞外液... 

【文章来源】：天津医科大学天津市 211工程院校

【文章页数】：98 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
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英文摘要
正文
    1 前言
    2 概论
        2.1 海马和离体海马脑片
            2.1.1 海马结构和分区
            2.1.2 海马的细胞构筑
            2.1.3 海马的环路网络模式和海马脑片研究的理论依据
        2.2 海马的神经递质
            2.2.1 海马递质概要
            2.2.2 海马的兴奋性氨基酸递质
            2.2.3 海马的抑制性氨基酸递质
        2.3 选题的意义和研究内容
            2.3.1 选题依据和意义
            2.3.2 选择离体脑片方法的依据
            2.3.3 神经递质和检测方法的选择依据
                2.3.3.1 选择测定8种氨基酸递质和2种单胺递质的原因
                2.3.3.2 选择高效液相色谱法定量分析的原因
            2.3.4 研究内容
    3 材料与方法
        3.1 实验材料
            3.1.1 动物
            3.1.2 药品、化学试剂
            3.1.3 标准液、缓冲液及灌流介质
            3.1.4 器材
        3.2 实验方法
            3.2.1 离体脑片低氧模型的建立
                3.2.1.1 人工脑脊液的配制
                3.2.1.2 离体脑片制备和体外培育
                3.2.1.3 健康脑片的选定标准
                3.2.1.4 离体脑片急性低氧模型
            3.2.2 形态学方法
            3.2.3 离体海马脑片灌流方法
                3.2.3.1 灌流装置
                3.2.3.2 灌流介质
                3.2.3.3 灌流方法
            3.2.4 脑片孵育液中神经递质的定量分析方法
                3.2.4.1 氨基酸类神经递质的rP-HPLC-UV柱前衍生定量分析
                3.2.4.2 DA和NE反相高效液相电化学色谱法（rP-HPLC-ECD）定量分析
            3.2.5 实验设计与分组
            3.2.6 统计学方法
    4 结果
        4.1 Ginkgolide B对低氧海马脑片CAl区神经元形态结构的影响
            4.1.1 解剖显微镜观察
            4.1.2 光学显微镜观察
        4.2 海马脑片释放氨基酸递质的特征
            4.2.1 氨基酸的基础释放量和去极化释放量的比较
            4.2.2 Ca~（2+）依赖性与Ca~（2+）非依赖性的氨基酸释放
        4.3 低氧条件下脑片氨基酸递质的释放
            4.3.1 低氧增加海马脑片氨基酸递质的基础释放量
            4.3.2 低氧对海马脑片氨基酸递质去极化释放量的影响
            4.3.3 Ca~（2+）对低氧脑片氨基酸递质释放的影响
            4.3.4 低氧条件下脑片释放的各种氨基酸递质之间的相互关系
                4.3.4.1 正常aCSF孵育介质中各种氨基酸之间的相关性分析
                4.3.4.2 高K~+去极化孵育介质中各种氨基酸之间的相关性分析
                4.3.4.3 无Ca~（2+）孵育介质中各种氨基酸之间的相关性分析
                4.3.4.4 谷氨酸和牛磺酸的关系因孵育条件不同而异
        4.4 Ginkgolide B影响低氧脑片氨基酸类神经递质的释放
            4.4.1 Ginkgolide B预孵育明显减少低氧时海马脑片神经递质的基础释放量
            4.4.2 Ginkgolide B预孵育对低氧时海马脑片神经递质去极化释放量的影响
            4.4.3 Ginkgolide B作用与细胞外液中Ca~（2+）的关系
        4.5 低氧对海马脑片释放NE的影响
            4.5.1 基础释放量
            4.5.2 去极化释放量
        4.6 Ginkgolide B对低氧脑片NE释放的影响
            4.6.1 基础释放量
            4.6.2 去极化释放量
        4.7 低氧对海马脑片释放DA的影响
            4.7.1 基础释放量
            4.7.2 去极化释放量
        4.8 Ginkgolide B对低氧脑片DA的释放的影响
            4.8.1 基础释放量
            4.8.2 去极化释放量
            4.8.3 脑片释放DA和谷氨酸的关系
        4.9 低氧对海马脑片神经递质释放和GrinkgolideB作用的总结
    5 讨论
        5.1 离体脑片模型在低氧研究中的应用和评价
        5.2 海马的神经递质和低氧损伤
            5.2.1 谷氨酸和低氧
                5.2.1.1 低氧时海马脑片释放谷氨酸增加
                5.2.1.2 细胞外液离子成分改变对谷氨酸兴奋毒性作用的影响
                5.2.1.3 对谷氨酸和兴奋毒性假说的几点质疑和补充
            5.2.2 牛磺酸可能是对抗兴奋毒性作用的主要力量
                5.2.2.1 牛磺酸在海马分布的证据和生物学作用
                5.2.2.2 低氧时脑片释放牛磺酸增加
                5.2.2.3 低氧时脑片释放牛磺酸和谷氨酸的相关性分析
            5.2.3 甘氨酸：低氧损伤过程中的“双面刃”?
            5.2.4 γ-氨基丁酸
                5.2.4.1 γ-氨基丁酸的功能主要是抑制性调控
                5.2.4.2 低氧引起GABA释放增加是神经元的一种自身保护机制
                5.2.4.3 低氧引起GABA释放增加的机制探讨
                5.2.4.4 GB减少低氧海马脑片释放GABA
            5.2.5 多巴胺
                5.2.5.1 多巴胺可能与神经元的低氧损伤有关
                5.2.5.2 Crinkgolide对低氧脑片释放多巴胺的影响
                5.2.5.3 低氧时多巴胺与谷氨酸作用的相互关系分析
        5.3 Ginkgolide神经保护作用的评价
        5.4 设想：膜脂质源性信使分子-PAF与海马低氧信号转导
            5.4.1 传统第二信使分子对海马神经元的调制
            5.4.2 PAF作为候选信使分子的依据
            5.4.3 PAF可能是海马低氧信号转导过程的“枢纽”信号分子之一
            5.4.4 关于PAF有待解决的问题
    6 结论
    7 参考文献
附录
    Ⅰ 低氧对大鼠海马离体脑片CAl区诱发群峰电位的影响
    Ⅱ 综述：海马神经元低氧损伤的细胞机制
    Ⅲ 缩略语英汉对照表
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]低氧诱导因子-1的结构、功能、调节及其与低氧信号转导的关系[J]. 叶红,金咸瑢.  生理科学进展. 2001(01)
[2]低氧反应通路[J]. 吕国蔚.  生理科学进展. 2001(01)
[3]高亲和力谷氨酸转运体[J]. 杨如,杨雄里.  生理科学进展. 2000(04)
[4]睫状神经营养因子对应激引起大鼠海马神经元损伤的保护作用及其机制的研究[J]. 严进.  生理科学进展. 2000(02)
[5]离体实验模型在评价神经保护剂中的应用[J]. 张拥波.  中风与神经疾病杂志. 1999(06)
[6]操作式条件反射训练对大鼠脑海马区游离氨基酸的影响[J]. 舒鸿钧,韩慧婉,赵睿,陈义,刘国诠.  高等学校化学学报. 1999(11)
[7]褪黑素抑制低氧引起大鼠大脑皮层氨基酸递质释放[J]. 顾靖,李学君,孙凤艳.  生理学报. 1999(04)
[8]大鼠脑组织中氨基酸类神经递质的rP-HPLC-UV柱前衍生定量分析[J]. 祁艳斌,张纬,刘德敏.  天津医科大学学报. 1998(04)
[9]海马兴奋性氨基酸及其受体作用的某些进展[J]. 薛保建,王志安,何瑞荣.  河北医科大学学报. 1998(06)
[10]大鼠脑组织中儿茶酚胺类神经递质的rP-HPLC-ECD定量分析[J]. 张纬,祁艳斌,刘德敏.  天津医科大学学报. 1998(03)



本文编号：3584914