杜氏利什曼原虫无鞭毛体表达抗原的Western blot和MALDI-TOF/TOF分析

发布时间：2023-02-19 15:41

　　目的鉴定杜氏利什曼原虫无鞭毛体特异表达抗原。方法培养杜氏利什曼原虫前鞭毛体并体外转化无鞭毛体,其总蛋白经2-DE电泳后以小鼠抗杜氏利什曼原虫无鞭毛体血清进行Western blot,对前鞭毛体与无鞭毛体特异表达抗原蛋白进行MALDI-TOF/TOF串联质谱鉴定。重组表达无鞭毛体特异表达抗原编码基因,以Western blot法对重组蛋白进行鉴定。结果等量的杜氏利什曼原虫前鞭毛体与无鞭毛体蛋白经2-DE电泳均可呈现680⁷42个蛋白点,Western blot及MALDI-TOF/TOF-MS分析甘油醛3-磷酸脱氢酶与延伸因子2为杜氏利什曼原虫前鞭毛体特异表达抗原,核苷二磷酸激酶为无鞭毛体特异表达抗原。重组核苷二磷酸激酶编码基因表达产物经Western blot证实为杜氏利什曼原虫无鞭毛体特异表达强抗原。结论杜氏利什曼原虫前鞭毛体与无鞭毛体抗原表达存在差异,核苷二磷酸激酶为杜氏利什曼原虫无鞭毛体特异表达强抗原。

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【文章目录】：
材料与方法
    1材料
    2方法
    3 rNDPK的抗原性鉴定
结果
    1抗血清效价
    2杜氏利什曼原虫总蛋白的2-DE电泳
    3杜氏利什曼原虫前鞭毛体与无鞭毛体差异表达抗原的质谱鉴定
    4杜氏利什曼原虫NDPK的表达与纯化
    5 rNDPK的抗原性鉴定
讨论



本文编号：3746493