海分枝杆菌感染斑马鱼成鱼模型的构建

发布时间：2024-04-01 01:09

　　目的构建海分枝杆菌感染斑马鱼模型,对先导化合物的有效性及其代谢衍生物进行检测,以有效降低药物体内筛选的成本。方法采用海分枝杆菌感染斑马鱼成鱼,测定斑马鱼的存活率,用HE以及Ziehl-Neelsen染色的方式,观察斑马鱼体内肉芽肿形成情况,并对形成的肉芽肿数进行计数,用于评价抗结核药物利福平对斑马鱼成鱼结核病的治疗效果,结合细菌菌落定量PCR计算利福平给药的IC₅₀值。结果成功构建了海分枝杆菌感染斑马鱼的抗结核药物筛选模型。利福平可以减少海分枝杆菌感染斑马鱼体内的肉芽肿数目和细菌数,对照组肉芽肿数目平均有28个,200μmol/L利福平给药组有5.6个,而利福平高剂量组未发现肉芽肿,两个治疗组与对照组相比均有显著性差异(P <0.05)。利福平成鱼给药的IC₅₀值为52.5μmol/L。结论海分枝杆菌-斑马鱼感染模型结合细菌菌数定量PCR分析方法是一种简单、高效的抗结核药物体内筛选模型,可用于抗结核药物的筛选与评价。

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 菌株
        1.1.2 实验动物
        1.1.3 试剂盒
    1.2 方法
        1.2.1 显微注射
        1.2.2 利福平的处理方法
        1.2.3 斑马鱼切片染色
        1.2.4 qPCR测定海分枝杆菌DNA
        1.2.5 IC50的计算
2 结果
    2.1 海分枝杆菌感染斑马鱼成鱼
    2.2 利福平可以减少海分枝杆菌感染斑马鱼体内的肉芽肿数目和细菌数
    2.3 应用qPCR计算利福平成鱼给药的IC50
3 讨论



本文编号：3944775