1．HLA-A2/HPV6E7四聚体的构建和应用 2．FPH致病基因定位于19p13.1-19pter

发布时间：2024-04-02 06:13

　　目的: HPV6对皮肤粘膜的感染往往造成局部组织增生而形成CA,CA的转归与患者的细胞免疫功能密切相关。为了探讨CA患者的T细胞免疫状态,本研究拟:①构建一种能够与HPV6E7抗原特异性T细胞结合的HLA-A2/HPV6E7四聚体;②应用该四聚体来检测不同病程CA患者的抗原特异性T细胞的频率。 方法:①通过原核表达、大量提取HLA-A2-BSP、β2m两种蛋白,通过体外稀释复性、与人工合成的HPV6E7抗原肽(GLHCYEQLV)折叠形成相应的HLA-A2/HPV6E7单体,经过Western-blot和ELISA证实其构象正确。在BirA酶的作用下,将生物素结合到HLA重链的BSP位点,实现HLA-A2/HPV6E7单体的特异位点生物素化。通过生物素与亲合素4:1的特异性结合关系,将4个生物素化的HLA-A2/ HPV6E7单体与PE标记的亲合素结合形成HLA四聚体;②以制备的PE标记的HLA-A2/HPV6E7四聚体和FITC-CD8单克隆抗体对HLA-A2阳性、HPV6感染致CA患者的PBL和疣体组织进行双色荧光染色,经流式细胞仪和荧光显微镜观察。③通过T2细胞(HLA-A2阳性...

【文章页数】：126 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
前言
中文摘要
英文摘要
第一部分 HLA-A2/HPV6E7 四聚体的构建
    材料与方法
    结果
    讨论
第二部分 利用 HLA-A2/HPV6E7 四聚体检测抗原特异性 CTL
    材料与方法
    结果
    讨论
第三部分 家族性进行性色素过度沉着症致病基因定位于 19p13.1-19pter
    材料与方法
    结果
    讨论
第四部分 FPH 家系的 STK11 基因的克隆和序列鉴定
    材料与方法
    结果
    讨论
小结
参考文献
综述
致谢
附录1 （英文缩略词表）
附录2 （攻读学位期间发表论文）



本文编号：3945940