HIV-lgp120基因片段的克

发布时间：2024-06-06 06:05

　　目的：人免疫缺陷病毒(HIV)是引起艾滋病的病原体，分为两型，HIV-1和HIV-2。HIV-1在全球范围传播广泛，是艾滋病流行的主要病原体。HIV-1外膜蛋白gp120(HIV-1 env gp120,简称gp120)是HIV-1的重要抗原成分，是检测抗gp120抗体诊断HIV-1感染试剂盒的重要组成成份，也是制备抗gp120单克隆抗体必需的免疫原，应用十分广泛，意义十分重大。本文旨在通过基因工程的方法获得高纯度的gp120抗原。 方法：以HIV-1 HXB2 cDNA 为模板进行PCR，扩增出gp120抗原的基因片段，再将这段基因片段与T载体pMD-18T连接，构建重组克隆质粒pMD-18T-120。经PCR、双酶切和DNA序列分析鉴定后，用NdeI和Xho I对基因重组正确的克隆进行酶切，将所得目的基因插入到质粒pET-22b相应的多克隆位点，构建重组表达质粒pET-22b-gp120，进行PCR、酶切鉴定和DNA序列分析。用鉴定基因重组正确的表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)，IPTG小量诱导,诱导产物用SDS-PAGE电泳进行分析。选择可产生目的蛋白的克隆，转接至2L的L...

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【学位级别】：硕士

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英文摘要
研究论文 HIV-1gp120基因片段的克隆、表达、纯化、鉴定和初步应用
    前言
    材料与方法
    结果
    讨论
    小结
    参考文献
    附图
综述 HIV检测试剂研究进展
致谢
个人简历



本文编号：3990413