Orexin A对大鼠额叶皮质锥体细胞兴奋性的影响

发布时间：2024-11-24 21:55

　　Orexin(ORX)是1998年发现的一种来自侧下丘脑区(LHA)具有神经兴奋作用的多肽。Orexin系统包括来自同一基因转录产物的二个单体(ORX-A和B)及其对应的两个G蛋白偶联受体(OX1R和OX2R)。大量证据发现侧下丘脑orexin系统对觉醒-睡眠周期的调控起关键作用。目前对orexin促觉醒作用的研究主要集中于皮层下(脑干、下丘脑内)的觉醒睡眠调节区如蓝斑核、背缝核、结节状乳头体核、及脑桥脚核等结构，而对侧下丘脑的orexin与皮层本身的关系研究极少。形态学证据显示侧下丘脑的orexin纤维和受体广泛分布于大脑皮层尤其是额叶皮质的Ⅴ、Ⅵ层。临床研究发现发作性睡病患者大脑皮质的orexin纤维有选择性的丢失。迄今为止，侧下丘脑的orexin是否具有直接兴奋大脑皮质功能未见文献报道。 本实验以急性分离Wistar大鼠额叶皮质(frontal cortex, FCX)锥体细胞为研究对象，采用膜片钳全细胞记录技术，观察了FCX锥体细胞的基本电生理特性；orexin A对其兴奋性的影响及其离子机制；orexin A对谷氨酸和GABA介导的兴奋作用的影响。藉此探讨or...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1额叶皮质（FCX）的部位及取材位置（方框内）

、AP5(50mM)、和CNQX(10me，0.002761gCNOX，0.009855gml双蒸水中，0℃以下保存备用分离取脑，置入混和气(95%O2，5%C端(2～4mm)按冠状面切成约30ACSF中孵育1h以上；在1g次，在深色背景下分出额叶皮....

图3细胞封接过程中测试方波的变化过程：由上到下为记录电极分别在溶液中、接近细胞、进一步靠近细胞、形成giga封接及破膜后形成全细胞膜片钳的波形

则可打破电极尖端的细胞膜，使细胞内液与电极内液相通，形成所谓的“全细胞膜片”(图3“gowholecell”)，这时记录方式即是全细胞记录。图2膜片钳记录系统示意图灌流槽

图5在系列由超极化到去极化的跃阶电流（-60⁺40pA,step=10，时长100ms）

第三军医大学硕士学位论文记录方式下，0.1mM的GABA使细胞膜发生超极化伴自发性)。加药装置的可靠性，排除因其它因素对神经元造成假阳性结果盐水或正常ACSF以作对照，结果膜电位和放电频率均未见

图6在系列由超极化到去极化的跃阶电流（-60⁺40pA,step=10，时长200ms）刺激下，FCX锥体细胞产生的动作电位数目增多

5在系列由超极化到去极化的跃阶电流(-60⁺40pA,step=10，时长100ms刺激下，FCX锥体细胞产生动作电位

本文编号：4012524