牛肾上腺髓质嗜铬细胞的分离纯化及其效果评价

发布时间：2025-03-19 03:13

　　尽管大量研究显示出肾上腺髓质嗜铬细胞(AMCC)移植在疼痛治疗中的显著效果,但将其作为基本治疗方法用于临床还存在许多困难,其中有限的细胞来源是AMCC 移植广泛应用的最大障碍。牛的肾上腺由于髓质细胞产量大、易分离获取而成为首选的供体来源。但利用目前通常采用的分离纯化方法得到的AMCC,不仅细胞产率、纯度低,而且工艺成本高,很难满足临床大量移植的需要。 为此,本文在现有AMCC 分离纯化工艺基础上,结合本实验室的研究基础和实验条件,建立了牛肾上腺髓质嗜铬细胞(BCC)的分离纯化方法,并通过体外生物学特性及体内移植止痛的实验研究对BCC 功能进行了评价。 采用胶原酶灌注、机械分离及Percoll 非连续密度梯度离心的方法获得纯化的BCC,平均每个肾上腺可得到0.7～3.1×10～8个BCC,而且存活率在99%以上,纯度大于95%。 随着体外培养时间的延长,BCC 胞浆变暗、胞膜皱缩,细胞存活率及儿茶酚胺含量也逐渐下降,但葡萄糖和乳酸浓度无明显变化。说明BCC 在体外培养具有分泌儿茶酚胺功能活性,但代谢速率极低。 通过对大鼠蛛网膜...

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1.1肾上腺组织化学示意图

图1.1肾上腺组织化学示意图Fig1.1Adrenalhistochemicalschematic

图2.1机械解离法得到的BCC×200Fig2.1BCCisolatedbymechanicaldissociation×200

图2.1机械解离法得到的BCC×200Fig2.1BCCisolatedbymechanicaldissociation×200

图2.2胶原酶灌注消化分离得到的BCC×200Fig2.2BCCisolatedbycollagenaseperfusiondigestion×200

图2.1机械解离法得到的BCC×200Fig2.1BCCisolatedbymechanicaldissociation×200

图2.3Dextran非连续密度梯度离心纯化得到的BCC×200Fig2.3BCCpurifiedbyDextrandiscontinuousdensitygradientcentrifugation×200

2.3Dextran非连续密度梯度离心纯化得到的BCC×Fig2.3BCCpurifiedbyDextrandiscontinuousdensitygradiecentrifugation×200

本文编号：4036605