hi FGF2真核表达载体的构建及其高表达对细胞凋亡的影响

发布时间：2017-06-24 01:06

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【摘要】：目的构建hi FGF2(high molecular weight isoform fibroblast growth factor-2,hi FGF2)真核表达载体,并观察其过表达后对细胞凋亡的影响。方法设计合成hi FGF2 cDNA模板引物,Nhel和Hind III双酶切pDsRed1-N1质粒,T4DNA连接酶重组hi FGF2质粒,PCR扩增目的基因,琼脂糖凝胶电泳检测及测序鉴定。将重组hi FGF2质粒瞬时转染HEK293细胞,荧光倒置显微镜检测转染效率。AnnexinV-FITC/PI双染法流式细胞仪检测细胞凋亡。结果 hi FGF2真核表达载体符合设计要求,瞬时转染HEK293细胞的转染率达70%以上。过表达hi FGF2,HEK293细胞FITC/PI双染阳性率达(29.12±2.81)%,与正常组、转染空载体组差别有显著性(P0.01或P0.05)。结论成功构建hi FGF2真核表达载体,过表达hi FGF2导致细胞凋亡。
【作者单位】： 汕头大学医学院附属肿瘤医院;汕头大学医学院药理学教研室;
【关键词】： 高分子量碱性成纤维细胞生长因子 真核表达载体 转染 细胞凋亡 HEK细胞 流式细胞术
【基金】：国家自然科学基金资助项目(No 30901810) 广东省自然科学基金资助项目(No 9151503102000013)
【分类号】：R363
【正文快照】： V-FITC/PI双染法流式细胞仪检测细胞凋亡。结果hiFGF2真核表达载体符合设计要求,瞬时转染HEK293细胞的转染率达70%以上。过表达hi FGF2,HEK293细胞FITC/PI双染阳性率达(29.12±2.81)%,与正常组、转染空载体组差别有显著性(P0.01或P0.05)。结论成功构建hiFGF2真核表达载体,过

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本文编号：476732