M13噬菌体多克隆抗体的制备与鉴定

发布时间：2017-06-26 09:02

  本文关键词：M13噬菌体多克隆抗体的制备与鉴定，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的 :制备M13K07辅助噬菌体多克隆抗体。方法:将M13K07辅助噬菌体进行大量扩增,以此作为免疫原于1、3、5周进行兔免疫,收集0周和免疫后2、4、6、8周免疫血清,用间接ELISA法对兔免疫血清的效价进行检测,进一步用免疫斑点实验检测兔多克隆抗体与M13K07辅助噬菌体的特异性结合能力。结果:M13K07辅助噬菌体免疫兔可产生高效价的多克隆抗体,效价达1:3 200,并能特异性识别M13K07辅助噬菌体。结论:成功制备了高效价的M13K07辅助噬菌体多克隆抗体,为噬菌体展示技术研究提供了检测抗体。
【作者单位】： 温州医科大学附属第一医院检验科;温州医科大学分子病毒与免疫研究所/微生物学与免疫学教研室;
【关键词】： MK辅助噬菌体 多克隆抗体 免疫斑点实验 酶联免疫吸附试验 兔
【基金】：国家自然科学基金资助项目(81172463)
【分类号】：R392
【正文快照】： 噬菌体展示技术是将外源基因表达产物与噬菌体衣壳蛋白融合,使外源基因随外壳蛋白的表达而表达,同时将其遗传密码信息整合到噬菌体的基因组中,在此过程中,辅助噬菌体对噬菌粒的复制和组装发挥着至关重要的作用,只有在辅助噬菌体的协助下,噬菌体才能完成单链DNA复制[1-2]。M13K

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前6条

1 石娜;尹杰超;Dante Zarlenga;李广兴;任晓峰;;猪IL-15与PRRS病毒GP5基因核酸疫苗免疫效力[J];东北农业大学学报;2010年01期

2 任晓峰;马晓微;;M13噬菌体肽库扩增及兔抗血清制备[J];东北农业大学学报;2013年03期

3 唐丽;田海波;李广兴;任晓峰;;噬菌体展示技术原理及其在生物学研究中的应用[J];黑龙江畜牧兽医;2009年15期

4 杜东霞;张冉;;辅助噬菌体在噬菌体展示中的应用及研究进展[J];微生物学通报;2009年02期

5 侯晓红;朱珊丽;王乐丹;张丽芳;;E血清型沙眼衣原体抗体的制备及检测[J];温州医学院学报;2007年04期

6 胡巍,刘文,宋晓国;兔抗M13噬菌体酶标抗体的制备[J];淄博学院学报(自然科学与工程版);2002年04期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 马德星;潘龙;郎跃深;杨静红;李广兴;;3-1E/mChIL-15融合基因构建及在真核细胞中的表达[J];东北农业大学学报;2010年08期

2 杨巍;李广兴;孟凡丹;王鑫;任晓峰;;猪流行性腹泻病毒N基因的克隆及原核表达[J];东北农业大学学报;2011年06期

3 洪琴;任晓峰;李广兴;;鸡痘DNA疫苗pVAX-env的构建及其体内外表达[J];东北农业大学学报;2011年06期

4 张凤;方礼禄;武文君;陈书明;;IL-15与临床疾病相关的研究进展[J];国外畜牧学(猪与禽);2012年04期

5 任晓峰;马晓微;;M13噬菌体肽库扩增及兔抗血清制备[J];东北农业大学学报;2013年03期

6 任晓峰;贾文龙;;猪流行性腹泻病毒S1蛋白截短表达及多抗制备[J];东北农业大学学报;2013年09期

7 王小三;张春杰;赵星灿;;猪繁殖与呼吸障碍综合征疫苗的应用现状及研究进展[J];河南农业科学;2012年03期

8 吴德芹;刘霄飞;刘文华;张灿;任慧英;;六株大肠杆菌噬菌体及其多克隆抗体的交叉抑制试验[J];青岛农业大学学报(自然科学版);2011年01期

9 裴亚峰;胡骁飞;王耀;侯玉泽;张改平;邓瑞广;;利用噬菌体随机肽库筛选抗原模拟表位的研究进展[J];河南农业科学;2012年10期

10 雷用东;王丹;童军茂;马越;张莉;赵晓燕;;接骨木花色苷组成及抗猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)活性分析[J];农业生物技术学报;2013年10期

中国博士学位论文全文数据库 前3条

1 李国江;吉林地区PRRS流行病学调查及真核疫苗构建与免疫原性研究[D];吉林大学;2011年

2 刘运超;人源化单链抗体噬菌体库的构建及抗TNF-α抗体的筛选[D];天津大学;2012年

3 刘原君;衣原体噬菌体phiCPG1衣壳蛋白Vp1对沙眼衣原体的作用研究[D];天津医科大学;2011年

中国硕士学位论文全文数据库 前8条

1 高磊;PRRSV GP5蛋白与猪IL-18基因共表达核酸疫苗的构建及免疫原性研究[D];吉林农业大学;2011年

2 杨巍;猪流行性腹泻病毒S1蛋白亲和肽的筛选与鉴定[D];东北农业大学;2011年

3 石立红;N-V蛋白酶两种ELISA检测方法的建立及其初步应用[D];吉林大学;2006年

4 李宗妍;水产品中恩诺沙星残留一步式酶联免疫快速检测方法的研究[D];中国海洋大学;2009年

5 王小三;PRRS不同免疫程序实施猪群抗体水平监测分析[D];河南科技大学;2012年

6 马晓微;猪流行性腹泻病毒S_(△16)蛋白亲和肽的筛选与鉴定[D];东北农业大学;2013年

7 徐富勇;DON模拟表位的两种表达载体的构建及应用研究[D];南昌大学;2013年

8 孙培茎;杨树皮类脂与细胞转移因子对SPF鸡生长性能和免疫机能的影响[D];河南农业大学;2013年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 杨健洋;;用噬菌体肽库筛选配体及其用途[J];传染病信息;2000年03期

2 任晓峰,李一经,李广兴,刘宝全;猪传染性胃肠炎病毒S基因杆状病毒/昆虫细胞表达系统重组质粒的构建[J];东北农业大学学报;2002年04期

3 师东方,贾永清,李一经,王君伟,马波,刘宝全;昆明鼠对猪轮状病毒核酸免疫的抗体应答[J];东北农业大学学报;2004年04期

4 师东方,李一经,王君伟,贾永清,马波,刘宝全;猪轮状病毒与传染性胃肠炎病毒核酸免疫研究[J];东北农业大学学报;2005年05期

5 钱刚,冯力,刘胜旺,佟有恩,童光志,黄永芬;猪传染性胃肠炎病毒纤突蛋白基因的修饰及原核表达的研究[J];东北农业大学学报;2005年05期

6 裴敦国;葛俊伟;马广鹏;姜艳萍;李一经;;抗猪流行性腹泻病毒N蛋白单克隆抗体制备及部分特性鉴定[J];东北农业大学学报;2008年07期

7 石娜;尹杰超;Dante Zarlenga;李广兴;任晓峰;;猪IL-15与PRRS病毒GP5基因核酸疫苗免疫效力[J];东北农业大学学报;2010年01期

8 杨巍;李广兴;孟凡丹;王鑫;任晓峰;;猪流行性腹泻病毒N基因的克隆及原核表达[J];东北农业大学学报;2011年06期

9 洪琴;任晓峰;李广兴;;鸡痘DNA疫苗pVAX-env的构建及其体内外表达[J];东北农业大学学报;2011年06期

10 高荣凯;王琰;;琥珀突变型辅助病毒VCSM13N1的构建[J];第二军医大学学报;2005年12期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 吴镝,许国双,陈香美,师锁柱,洪权,张萍,吕扬;抗人有机阴离子转运蛋白4多克隆抗体的制备及其在肾脏的定位研究[J];中国中西医结合肾病杂志;2005年06期

2 孙玉宁,靳更林,李燕,寿成超;人Norpeg蛋白的原核表达及其抗体的制备[J];宁夏医学院学报;2005年04期

3 黄柯;孟元光;韩为东;赵亚力;李琦;宋磊;;LRP16基因的多克隆抗体制备及表达的探索[J];军医进修学院学报;2007年02期

4 伍银桥;王孟薇;吴本俨;王刚石;尤纬缔;王卫华;;抗人胃癌相关蛋白GCRG224多克隆抗体的制备、鉴定及初步应用[J];细胞与分子免疫学杂志;2009年08期

5 杜洪桥;朱蓉;徐葛林;严家新;;两种亲和层析方法纯化兔抗CHO细胞蛋白多克隆抗体的比较[J];中国生物制品学杂志;2011年08期

6 安薇;徐霞;;人脂联素球状结构域基因的原核表达及多克隆抗体的制备[J];中国免疫学杂志;2011年09期

7 胡文森 ,吴明杰;~(99m)Tc单克隆抗体的放射免疫显象:临床研究[J];国际放射医学核医学杂志;1986年01期

8 徐永春,梁伟波,苟航,陈文婕,朱银华,贾静,张林;EB病毒GST-Rta融合蛋白的表达、纯化及其多克隆抗体的制备[J];四川大学学报(医学版);2005年05期

9 谢忠平,崔萍芳,宋霞,李华,龙润乡,洪超,熊秋霞,李文忠,李琦涵;利用HCV多表位复合抗原制备高效价抗体[J];中国生物制品学杂志;2005年04期

10 柯杭君,李清芬,李卓娅,姜小丹,冯玮,徐勇,熊平;抗人跨膜型肿瘤坏死因子-α多克隆抗体的制备和鉴定[J];华中科技大学学报(医学版);2005年04期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 杨敏;王锁英;许小朋;马洁;毛朝明;仝佳;邱谷风;胡正军;王胜军;邵启祥;许化溪;;人T-bet基因的表达、纯化及其多克隆抗体的制备[A];中国免疫学会第五届全国代表大会暨学术会议论文摘要[C];2006年

2 张敏;池霞;洪琴;童梅玲;郭锡熔;;人类肥胖相关新基因LYRM1多克隆抗体的制备及鉴定[A];中华医学会第十五次全国儿科学术大会论文汇编（上册）[C];2010年

3 陈波;钱，

本文编号：485515