肠道病毒71型灭活疫苗的小鼠细胞免疫效果

发布时间：2017-07-28 13:38

  本文关键词：肠道病毒71型灭活疫苗的小鼠细胞免疫效果

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【摘要】：目的评价肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)灭活疫苗诱导小鼠的细胞免疫效果。方法分别以不同剂量(1、2.5、5、10μg/ml,均含铝佐剂1 mg/ml)、不同剂型(含铝佐剂1 mg/ml或不含铝佐剂)、不同免疫剂次(单次免疫或加强免疫)EV71灭活疫苗经腹腔免疫小鼠,0.5 ml/只,均设铝佐剂对照组(仅注射铝佐剂1 mg/ml)。采用经典小鼠树突状细胞(dendritic cell,DC)培养方法制备正常小鼠DC,瑞氏染色法检测细胞形态,流式细胞术分析其表型及纯度;免疫磁珠分选法(magnetic activated cell sorting,MACS)分离小鼠脾脏CD4+、CD8+T淋巴细胞,流式细胞术检测细胞纯度。ELISPOT法检测各组免疫小鼠CD4+、CD8+T淋巴细胞分泌IL-2、IL-4、IFNγ的水平;细胞因子试剂盒检测小鼠淋巴细胞培养上清及小鼠血清中细胞因子的水平。结果 DC形态不规则,表面树枝状突起形态不同,细胞核较大且不规则;DC纯度为(81.39±9.24)%,可高水平表达MHⅡ(I-A/I-E)类分子,中度表达CD86和CD40。CD4+、CD8+T细胞纯度分别为95.27%和94.08%。随着疫苗免疫剂量的增加,CD4+T细胞分泌IL-2、IL-4、IFNγ及CD8+T细胞分泌IFNγ的SFC显著增加,5μg/ml疫苗组达最大值,且明显高于其他组(P均0.05);5μg/ml疫苗组淋巴细胞培养上清中IFNγ、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-13、IL-5、TNF-α含量明显高于其他组(P0.05);1、2.5、5μg/ml疫苗组血清中IL-10含量明显高于铝佐剂对照组(P0.05),1μg/ml疫苗组明显低于2.5及5μg/ml疫苗组(P0.05)。含铝佐剂疫苗组CD4+T细胞分泌IL-2、IL-4、IFNγ及CD8+T细胞分泌IFNγ的SFC、淋巴细胞培养上清中IL-2、IFNγ、IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、IL-13、TNF-α水平及血清中IL-10含量均明显高于无铝佐剂疫苗组(P均0.05)。加强免疫组CD4+T细胞分泌IL-2、IL-4、IFNγ及CD8+T细胞分泌IFNγ的SFC、淋巴细胞培养上清中IL-2、IFNγ、IL-4、IL-5、IL-6、IL-10、IL-13、TNF-α水平、血清中IL-10含量均明显高于单次免疫组(P均0.05)。结论 EV71灭活疫苗可诱导小鼠产生特异性细胞免疫反应,本实验为其进一步人体临床试验研究奠定了基础。
【作者单位】： 北京生物制品研究所有限责任公司第二研究室;
【关键词】： 肠道病毒型 灭活疫苗 细胞免疫
【基金】：国家重大新药创制项目(2011ZX2009401-403-11) 863计划项目(2012AA02A401) 重大新药创制项目(2012ZX09101319)
【分类号】：R373.24
【正文快照】： 手足口病(hand foot mouth disease,HFMD)的主要病原体为肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71),该病临床症状主要为发热、手、足等部位出现皮疹及口腔溃疡等,少数EV71感染患者可引起中枢神经系统疾病[1-2],包括病毒性脑膜炎、脑炎、类似小儿麻痹的瘫痪,随后出现肺水肿、肺出血等

【共引文献】

中国硕士学位论文全文数据库 前5条

1 谢新星;不同肠道病毒感染致242例重型手足口临床特点分析[D];遵义医学院;2013年

2 王冠洲;EV71感染宿主中枢神经系统过程中宿主因子作用的初步探究[D];北京协和医学院;2013年

3 刘雪;EV71感染患儿细胞免疫功能和外周血单个核细胞Toll样受体的变化及临床意义[D];第四军医大学;2013年

4 马娜;EV71对星形胶质细胞的感染及其病理意义的研究[D];昆明医科大学;2013年

5 刘春虹;中枢神经系统感染与脑脊液IFN-γ、CRP、NSE的研究[D];宁夏医科大学;2013年

【相似文献】

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1 Q萌示，

本文编号：584350