富血小板血浆对体外培养骨髓间充质干细胞增殖及成骨分化的影响

发布时间：2017-07-28 22:08

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【摘要】：目的探讨不同浓度的富血小板血浆(PRP)对体外培养的大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖及成骨能力的影响。方法取大鼠骨髓组织,密度梯度离心法体外分离培养BMSCs。取第3代细胞接种,分别加入含0.5%、1%、2%、5%、10%PRP的成骨诱导液或DMEM培养基进行培养,并以加入不含PRP的成骨诱导液或DMEM培养基培养(0 PRP)的BMSCs作对照。采用XTT比色法测定BMSCs的增殖情况。分别于培养3、7、11 d时用ELISA法测定细胞碱性磷酸酶(ALP)活性,培养7、14、21 d时用放射免疫法检测骨钙素(OCN)表达量,培养21 d时用茜素红染色观察钙化结节形成能力。结果成骨诱导培养的前7 d,PRP可促进BMSCs增殖,成骨诱导培养7 d以后,PRP也可促进BMSCs的成骨分化,且随着PRP浓度的增加,促细胞增殖、分化和成骨能力逐渐增强。PRP促进BMSCs内ALP活性和OCN表达的作用也呈剂量依赖性。成骨诱导培养21 d后,5%、10%的PRP诱导钙化结节形成能力优于0.5%、1%和2%的RPR,0 PRP培养的BMSC仅见少量钙化结节形成。结论在体外成骨诱导培养条件下,RPR能有效促进BMSCs的生长增殖和成骨分化,以浓度10%为最佳。
【作者单位】： 广东省中山市人民医院烧伤整形科;广东省中山市博爱医院整形美容外科;赣南医学院第一附属医院骨外科;南方医科大学组织工程研究中心;
【关键词】： 富血小板血浆 骨髓间充质干细胞 组织工程 细胞增殖 成骨分化
【基金】：2013年度广东省中山市第二批科技计划项目(医疗卫生)(编号:20132A086)
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 种子细胞、生长因子和生物支架是构建骨组织工程的三要素。骨髓间充质干细胞(bone marrow mesen-chymal stem cells,BMSCs)因具有来源广泛、扩增迅速、成骨潜能高等优点,是骨组织工程中较为理想的种子细胞[1-5]。富血小板血浆(platelet-rich plasma,PRP)经激活后能释放出大量

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