腺病毒、呼吸道合胞病毒和博卡病毒三重荧光RT-PCR快速检测的研究分析

发布时间：2017-07-30 21:00

  本文关键词：腺病毒、呼吸道合胞病毒和博卡病毒三重荧光RT-PCR快速检测的研究分析

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【摘要】：目的利用荧光定量RT-PCR技术建立一种快速检测腺病毒、合胞病毒和博卡病毒的方法。方法从Gen Bank随机下载腺病毒、合胞病毒和博卡病毒的目的基因,通过MEGA分析,利用Primer Express3.0软件设计三对引物及其相应的Taqman探针,利用一步法RT-PCR来建立和优化反应体系。10倍稀释阳性对照,来检验建立体系的灵敏度和重复性。利用具有相似临床症状的呼吸道病毒检验建立体系的特异性。结果建立了一个单管对腺病毒、呼吸道合胞病毒和博卡病毒进行检测的三重荧光RT-PCR反应体系。该体系的检测灵敏度为102 copies/μl,扩增效率分别为92.24%、96.95%和99.70%,标准曲线的相关系数大于99%,重复性变异系数3.5%,特异性实验未发现有非特异性扩增。结论建立的三重荧光可以快速、准确地检测腺病毒、合胞病毒和博卡病毒。
【作者单位】： 广东省深圳市疾病预防控制中心 深圳市科技创新委重大传染病监控重点实验室 深圳市病原微生物资源库建立与应用公共服务平台;广东省深圳市疾病预防控制中心 深圳市科技创新委重大传染病监控重点实验 室深圳市病原微生物资源库建立与应用公共服务平台;
【关键词】： 腺病毒 呼吸道合胞病毒 博卡病毒 三重荧光RT-PCR
【基金】：深圳市科技计划项目(201202089) 广东省部产学研项目(2012B091100105)
【分类号】：R373.1
【正文快照】： 腺病毒(adenovirus,HAV)是一种没有包膜的DNA病毒,基因组长约25~45 kb,1956年由科学家Morris在患有感冒的黑猩猩的鼻分泌中发现[1]。呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,HRSV)是一种RNA病毒,在1953年被发现,属于副黏病毒科,主要有A和B两个亚型[2]。博卡病毒(bocaviru

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 邹丽容;郑夔;周杰;莫艳玲;方苓;陈秋霞;李晖;柯昌文;;荧光定量PCR方法快速检测人博卡病毒的研究[J];华南预防医学;2009年06期

2 何瑰;程春燕;陈娟;;呼吸道合胞病毒实时荧光RT-PCR定量检测方法的建立[J];分子诊断与治疗杂志;2009年03期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 何霞;曹开源;;人博卡病毒及其在中国的流行现状[J];病毒学报;2013年01期

2 邓幼平;刘颖娟;王笑臣;张一卉;刘媛媛;杨占秋;赵东赤;;Taqman PCR检测人博卡病毒的阳性率[J];海南医学院学报;2014年03期

3 郑文芝;张骞;魏建民;薛鹏浩;王翔;赵智慧;郑丽舒;;呼吸道合胞病毒TaqMan探针实时定量RT-PCR检测方法的建立及应用[J];生物技术通讯;2012年02期

中国硕士学位论文全文数据库 前1条

1 张菲;多重实时荧光定量PCR检测人博卡病毒的价值[D];南华大学;2012年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 何瑰;程春燕;;呼吸道合胞病毒及其基因检测[J];分子诊断与治疗杂志;2009年01期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 林峰;;人博卡病毒感染的研究进展[J];病毒学报;2007年02期

2 傅希;伍严安;;博卡病毒的研究进展[J];医学综述;2007年15期

3 陈倩;胡正;;人博卡病毒的研究进展[J];中国当代儿科杂志;2010年08期

4 李建宁;姚青;孙玉宁;;博卡病毒属基因组特征与致病的分子机制[J];微生物学报;2013年05期

5 何涛君;王琼;何英;黄烈;张银辉;林广裕;陆学东;;采用半巢式PCR技术从临床标本中克隆人类博卡病毒的全基因[J];国际检验医学杂志;2014年01期

6 黄头华;;我国医学界首次发现人类博卡病毒[J];中国医药指南;2006年09期

7 何慧;刘新;;新发现的呼吸道感染病原——人博卡病毒[J];医学综述;2008年21期

8 钱渊;;人博卡病毒研究进展[J];中国实用儿科杂志;2009年01期

9 周建林;伍严安;;人博卡病毒的研究进展[J];医学综述;2009年12期

10 邹丽容;郑夔;周杰;莫艳玲;方苓;陈秋霞;李晖;柯昌文;;荧光定量PCR方法快速检测人博卡病毒的研究[J];华南预防医学;2009年06期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 曹虹;彭亮;;新型微小病毒——人类博卡病毒[A];新发和再发传染病防治热点研讨会论文集[C];2009年

2 林峰;曾爱平;杨宁敏;林海燕;郑昌华;李桦;陈弘;李旭阳;郁明素;金大智;王升启;;小儿博卡病毒感染的临床与实验研究[A];2006（第三届）江浙沪儿科学术会议暨浙江省儿科学术年会论文汇编[C];2006年

3 林峰;曾爱平;林海燕;郑昌华;李桦;陈弘;李旭阳;郁明素;杨宁敏;金大智;王升启;;小儿博卡病毒感染的临床与实验研究[A];中华医学会第十四次全国儿科学术会议论文汇编[C];2006年

4 陆学东;林广裕;周仁彬;王琼;林创兴;杨来智;陆长东;;广东地区首例人博卡病毒的检出及鉴定[A];中华医学会第七次全国检验医学学术会议资料汇编[C];2008年

5 王婷;李昌崇;陈小芳;聂颖;崇蕾;;温州地区人博卡病毒在急性喘息患儿中的检测及其病毒载量与疾病严重程度的相关分析[A];2012年江浙沪儿科学术年会暨浙江省医学会儿科学分会学术年会、儿内科疾病诊治新进展国家级学习班论文汇编[C];2012年

6 林峰;;人博卡病毒感染支气管上皮细胞的生物学特征研究[A];2008年浙江省儿科学学术年会论文汇编[C];2008年

7 王婷;李昌崇;陈小芳;聂颖;崇蕾;;温州地区人博卡病毒在急性喘息患儿中的检出及其病毒载量与疾病严重程度的相关分析[A];中华医学会第十三届全国儿科呼吸学术会议论文汇编[C];2012年

8 李芳;孙玉宁;张茜;芦晓红;;博卡病毒MVC在不同种属细胞系病毒基因组复制及感染特性分析[A];中国的遗传学研究——遗传学进步推动中国西部经济与社会发展——2011年中国遗传学会大会论文摘要汇编[C];2011年

9 何彪;杨凡力;涂长春;;中国蝙蝠病毒宏基因组学研究[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年

10 王维;林书祥;黄敬孚;徐晓华;;天津地区婴幼儿腹泻博卡病毒的检出及鉴定[A];中华医学会第十七次全国儿科学术大会论文汇编（上册）[C];2012年

中国重要报纸全文数据库 前8条

1 记者　 邓明 通讯员　 白培生 刘巧突;郴州在国内首次发现人类博卡病毒[N];湖南日报;2006年

2 记者 吴德群;口岸连查4宗 人感染博卡病毒[N];深圳特区报;2012年

3 陈茂j 赵斌;温岭市一院在我国首次发现人博卡病毒[N];中国医药报;2006年

4 记者 王理略 通讯员 任丽琼;首次克隆出人博卡病毒全基因组[N];湖北日报;2014年

5 贵州大学动物科学学院 郝飞 汤德元;猪博卡病毒研究进展[N];河北科技报;2012年

6 记者　 龙军;我国首次发现人类博卡病毒HBoV[N];光明日报;2006年

7 洪卫 张敏;迎接照耀医学高峰的新曙光[N];浙江日报;2006年

8 何彪 沈基飞;我学者发现新型SARS样冠状病毒[N];健康报;2014年

中国博士学位论文全文数据库 前3条

1 程卫霞;博卡病毒流行病学、致病性及基因进化研究[D];兰州大学;2011年

2 赵慧;儿童腹泻相关的人博卡病毒2型的初步研究[D];北京协和医学院;2013年

3 李京京;人类博卡病毒HBoV1基因组克隆及转录、翻译分子机制研究[D];华中师范大学;2012年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 马均;儿童急性呼吸道感染人博卡病毒检测及分析[D];吉林大学;2009年

2 梁丹丹;小儿呼吸道人类博卡病毒感染免疫致病机制的初步研究[D];汕头大学;2011年

3 漆正宇;我国人博卡病毒的分子流行病学及衣壳蛋白独有区表达纯化的研究[D];贵州大学;2007年

4 韩虎;人博卡病毒结构蛋白与非结构蛋白功能的初步研究[D];华中师范大学;2012年

5 李红学;人博卡病毒在健康献浆人群中的基因组和血清学抗体流行情况研究[D];北京协和医学院;2014年

6 周琼华;人博卡病毒在急性下呼吸道感染住院儿童中的现状分析[D];湖南师范大学;2011年

7 丁媛;重庆地区儿童呼吸道博卡病毒感染特点[D];重庆医科大学;2007年

8 张宏彪;猪博卡病毒在我国部分地区的分子流行病学调查及其荧光定量PCR方法的建立与应用[D];南京农业大学;2012年

9 李玲;不同检测方法在儿童急性下呼吸道人博卡病毒感染诊断中的应用[D];苏州大学;2014年

10 王美娟;人博卡病毒在苏州地区儿童急性呼吸道感染中的地位[D];苏州大学;2010年

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本文编号：596018