磁珠法DNA提取技术在多重连接依赖探针扩增检测中的应用

发布时间：2017-08-04 10:39

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【摘要】：目的探讨磁珠法DNA提取技术在多重连接依赖探针扩增(MLPA)检测样品制备中的应用价值。方法分别用半自动磁珠法和手工离心柱法提取1例21-羟化酶缺乏症患者和16例健康男性外周血、16例羊水细胞标本的基因组DNA,用MLPA法检测CYP21A2基因拷贝数,比较两种方法制备DNA的质量及MLPA结果。用磁珠法提取200例羊水细胞DNA,MLPA法检测染色体非整倍体异常表达情况。结果磁珠法提取外周血DNA的浓度和总量均高于离心柱法(P0.05)。两种方法提取羊水DNA浓度相当,磁珠法所得总量较高(P0.05)。21-羟化酶缺乏症患者CYP21A2基因拷贝数比值接近0.5。200例羊水标本中检出正常二倍体188例,21三体9例,18三体2例,特纳(Turner)综合征(45,X)1例,与核型分析结果一致。结论磁珠法制备的外周血和羊水细胞DNA适用于MLPA检测,具有较高的应用价值。
【作者单位】： 南京医科大学附属南京妇幼保健院产前诊断中心;
【关键词】： 磁珠法 DNA提取 多重连接依赖探针扩增技术
【基金】：江苏省医学创新团队与领军人才课题(LJ201109) 江苏省临床医学科技专项(BL2012039) 江苏省妇幼保健科研项目(F201206) 南京市科技发展计划项目(201201064) 南京市卫生局科技发展项目(YKK11059)
【分类号】：R346
【正文快照】： 多重连接依赖探针扩增技术(multiplex ligation-dependent probe amplication,MLPA)最早由Schouten等[1]研发,该技术利用少量DNA,一次反应可对40多个靶序列进行定量分析。目前MLPA检测主要用离心柱法[2]和酚-氯法[3]提取基因组DNA,国内尚未见半自动化DNA提取法在MLPA检测中的

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本文编号：619126