人补体受体2-Fc融合蛋白真核表达载体的构建与表达

发布时间：2017-08-04 12:38

  本文关键词：人补体受体2-Fc融合蛋白真核表达载体的构建与表达

  更多相关文章： 补体受体 补体 蛋白表达 人类免疫缺陷病毒

【摘要】：目的构建人补体受体2(CR2)-Fc融合蛋白基因表达载体,在中国仓鼠卵巢细胞(CHO)中表达人CR2-Fc蛋白。方法将人CR2片段和IgG1 Fc片段进行连接,克隆入PCI-neo表达载体。脂质体法将测序正确的重组真核表达载体转染CHO K1细胞进行蛋白表达,采用SDS-PAGE、Western blot法对蛋白表达进行检测和鉴定。结果利用双酶切及基因测序结果证实CR2-Fc基因序列正确,重组真核表达载体构建成功;SDS-PAGE检测纯化产物的相对分子质量(M r)与预期结果一致,Western blot法在同样位置检出条带。结论成功构建了CR2-Fc重组真核表达载体,获得了有活性的融合蛋白。
【作者单位】： 军事医学科学院疾病预防控制所;
【关键词】： 补体受体 补体 蛋白表达 人类免疫缺陷病毒
【基金】：国家自然科学基金(81072501)
【分类号】：R392.11
【正文快照】： 补体系统在机体抗病毒免疫中处于一线防御地位,是病毒建立感染所面对和克服的第一道天然屏障[1]。大量研究证实,补体在艾滋病发病各个过程中均发挥作用,但自然感染状态下,补体活性低下,无法清除人类免疫缺陷病毒(human immunedeficiency virus,HIV)[2]。研究表明虽然HIV感染早

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 贾雷立;马巍娜;宋宏彬;刘雪林;董世存;张传福;孙走南;钟彦伟;;CR2-DAF和DAF-CR2靶向补体抑制物的构建、表达与鉴定[J];细胞与分子免疫学杂志;2008年03期

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 贾雷立;马巍娜;宋宏彬;刘雪林;张传福;孙走南;钟彦伟;;CR2-CD59和CD59-CR2靶向补体抑制物的构建、表达与鉴定[J];免疫学杂志;2008年04期

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 王玮蓁,孔繁荣,朱学骏,陈洪,周向昭;蛋白表达在支原体研究中的应用[J];中国皮肤性病学杂志;1999年04期

2 李黎;邢福祺;陈士岭;;肿瘤坏死因子α对子宫内膜细胞基质金属蛋白酶9及其组织抑制物3蛋白表达的调控[J];中华妇产科杂志;2006年05期

3 王福生!100039北京,金磊!100039北京,雷周云!100039北京,施红!100039北京,洪卫国!100039北京,徐东平!100039北京,施明!100039北京,蒋建东,汪悦,张冰!100039北京,刘明旭!100039北京,李跃旗!100039北京;人类免疫缺陷病毒1感染相关的基因多态性在中国汉族人群中的分布[J];中华流行病学杂志;2000年04期

4 李晓丹,李进;UV-C诱导的体外凋亡SMC内Bcl-2蛋白表达的研究[J];第一军医大学分校学报;1999年01期

5 程芳洲,李庚山,余细球,唐国华,肖立新,周云;微量去甲肾上腺素预处理对缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡及相关蛋白表达的影响[J];中华老年心脑血管病杂志;2002年01期

6 常平,朱德新,杜江,封志纯;恙虫病东方体Karp株相对分子质量为47蛋白基因的克隆与表达[J];实用儿科临床杂志;2005年09期

7 李学军;戴晓天;杨和平;;金黄色葡萄球菌附属基因调节子的表达与纯化[J];重庆医学;2009年10期

8 刘杰;;HMGB1通过抑制Kv4基因转录和蛋白表达下调心肌瞬间外向钾电流[J];中国病理生理杂志;2010年10期

9 罗元辉，，房殿春，鲁荣，刘为纹，晋华源，门荣甫，周子成，王振华;胃癌组织P~（53）蛋白产物的表达与病人预后的关系[J];免疫学杂志;1995年03期

10 曹玉萍,张亚林;不同感染状态下的EB病毒蛋白表达与慢性疲劳[J];国外医学.精神病学分册;2000年04期

中国重要会议论文全文数据库 前10条

1 刘杰;;HMGB1通过抑制Kv4基因转录和蛋白表达下调心肌瞬间外向钾电流[A];中国病理生理学会第九届全国代表大会及学术会议论文摘要[C];2010年

2 杨桂棠;韩雅玲;康建;闫承慧;;E1A激活基因阻遏子在小鼠胚胎发育中的表达[A];中华医学会第11次心血管病学术会议论文摘要集[C];2009年

3 黄新莉;凌亦凌;周君琳;戴鸿雁;艾洁;;CCK-8对ES大鼠肺组织HO-1的表达的影响及机制探讨[A];第六次全国缺氧和呼吸病理生理学术会议论文摘要汇编[C];2003年

4 吴群;郑芳;姜小丹;冯玮;熊平;刘君炎;龚非力;;人类自然杀伤细胞中syntaxin 4和SNAP-23蛋白表达、定位和相互作用[A];湖北省暨武汉市免疫学会第八届学术会议论文集[C];2003年

5 赖西南;黄晖;;SP对表皮干细胞β-连环蛋白表达的调控作用[A];第七届全国创伤学术会议暨2009海峡两岸创伤医学论坛论文汇编[C];2009年

6 潘夕春;丁国富;周红;;人TLR9受体LRR8片段在大肠杆菌中的重组表达[A];中国药理学会化疗药理专业委员会第九届学术研讨会论文摘要集[C];2008年

7 颜奇坡;马玉媛;吕茂民;叶小丽;郑霖;吴健敏;田克恭;章金刚;;嗜人性PERV感染性克隆感染人源细胞后Stathmin蛋白表达差异分析[A];第五次全国免疫诊断暨疫苗学术研讨会论文汇编[C];2011年

8 郜攀;黄岚;郭瑞威;;B型利钠肽对小鼠腹腔巨噬细胞单核细胞趋化因子-1蛋白表达的双向调节作用[A];中华医学会第11次心血管病学术会议论文摘要集[C];2009年

9 张磊;费舟;李兵;赵永更;程光;;培养神经元机械性损伤谷氨酸、γ-氨基丁酸含量与Homer蛋白表达变化和关系的研究[A];中华医学会神经外科学分会第九次学术会议论文汇编[C];2010年

10 蒋玉凤;;结核分支杆菌抗原ESAT-6基因真核表达质粒的构建及蛋白表达的鉴定[A];中国防痨杂志2003第25卷增刊——2003年中国防痨协会全国学术会议论文集[C];2003年

中国重要报纸全文数据库 前10条

1 记者谢卫群;中国完成SARS病毒主要基因克隆和蛋白表达[N];人民日报海外版;2003年

2 胡德荣;生物体内痛觉诱发和维持新机制被揭示[N];健康报;2008年

3 通讯员 肖鑫 记者 朱智堂;曹雪涛等发现新型免疫分子[N];健康报;2000年

4 通讯员 朱智堂 肖鑫;我国免疫学研究取得重要进展[N];科技日报;2000年

5 本报记者 李红;让瘫痪的老鼠重新行走[N];科技日报;2003年

6 新华;疫苗研制进一步推进[N];保健时报;2003年

7 记者 骆红初;隔离SARS与人体“第三者”露面 全球首个人源抗体基因库建成[N];上海科技报;2003年

8 肖鑫 邵逸;我国发现新型免疫分子全长基因[N];中国医药报;2000年

9 ;吲哚美辛诱导HL－60细胞凋亡过程中伴有β－catenin／c－myc信号转导途径的抑制[N];中国医药报;2003年

10 任沪生;我国试用核酸干扰技术治疗乳腺癌[N];医药导报;2004年

中国博士学位论文全文数据库 前10条

1 何津岩;人类p100蛋白对HeLa细胞周期的影响及其机制研究[D];天津医科大学;2008年

2 曲银娥;COXⅦa在中老年男子部分雄激素缺乏综合征中的作用及机理研究[D];河北医科大学;2010年

3 吴春风;抗人诱骗受体3多克隆抗体、单克隆抗体的制备及初步应用[D];吉林大学;2008年

4 贾雪梅;艾滋病毒Vpr蛋白抑制KSHV裂解性周期复制：GSK-3β信号通路的作用[D];南京医科大学;2010年

5 李燕;沙眼衣原体Pmp蛋白的表达纯化及其临床检测的研究[D];天津医科大学;2007年

6 杜昆;沙眼衣原体CT703蛋白在感染细胞中的表达及功能初探[D];中南大学;2011年

7 韩利章;Sumo化修饰在Hedgehog信号通路转录因子Gli2活性调节中的作用研究[D];山东大学;2013年

8 安云飞;高IgM综合征及IPEX临床与分子特征研究[D];重庆医科大学;2011年

9 谭灿;hCUL4A过表达对缺氧/缺血—再供氧/再灌注损伤的保护作用及机制初探[D];中南大学;2012年

10 邵新宏;MiR-34a靶向调控NOTCH1基因对SW480细胞增殖影响及其机制[D];重庆医科大学;2013年

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 贾小英;组织蛋白酶L介导Ox-LDL诱导单层HUVECs通透性增加及其机制探讨[D];南华大学;2012年

2 谢奎;CHO细胞在Tubespin中的培养工艺及其代谢分析[D];暨南大学;2011年

3 覃健敏;IGF-1R基因多态性及p16、p21蛋白水平与巴马长寿关系的研究[D];广西医科大学;2011年

4 王燕;PIG11诱导HepG2细胞凋亡及其机制的初步探讨[D];南华大学;2010年

5 左旭;血管紧张素Ⅱ对KCNQ1/KCNE1钾通道蛋白表达的调节[D];河北医科大学;2012年

6 何涛;SARS-CoV结构蛋白的表达、纯化和鉴定及中国家养果子狸类SARS-CoV病毒的血清学检测[D];中国科学院研究生院（武汉病毒研究所）;2005年

7 王旭荣;SEDL基因重组腺病毒的构建及其对hFOB1.19细胞相关基因和蛋白表达的研究[D];重庆医科大学;2012年

8 李建娜;SARS-CoV主要结构蛋白的基因表达及DNA疫苗构建[D];华南热带农业大学;2005年

9 王宏;狂犬病毒CVS株核蛋白在大肠杆菌中的表达和鉴定[D];青岛大学;2007年

10 汪猜;人巨细胞病毒（HCMV）pp65基因的克隆、原核表达及抗原性研究[D];湖南农业大学;2005年

本文编号：619648