贵州省蚋类携带病原体和宿主种类的筛查

发布时间：2017-08-07 18:34

  本文关键词：贵州省蚋类携带病原体和宿主种类的筛查

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【摘要】：目的:(1)利用DNA条形码(DNA barcode,线粒体细胞色素C氧化酶亚基I基因5'端)和形态学特征鉴定贵州省蚋类物种;(2)以线粒体细胞色素b基因(Cytb)的特定区域及乙型肝炎基因序列为遗传标记,对贵州省蚋类携带的病原体及宿主种类进行筛查。方法:(1)标本来源:利用车载式捕虫网于2014年7-9月在贵州省7县(雷山、榕江、三穗、江口、德江、关岭、开阳)采集蚋类标本,每个地区设1-2个采集点;(2)标本处理:常规固定并形态学初步鉴定,解剖镜下切尾器制片;(3)蚋类物种鉴定:提取雌蚋DNA,PCR扩增蚋类COI基因并测序,使用生命数据条形码系统及系统发育方法进行分析,并结合形态学特征,鉴定蚋类物种;(4)蚋类病原体种类筛查:PCR分别扩增原虫Cytb基因及乙肝病毒基因并测序,根据在Gen Bank中的比对结果判断病原体种类;(5)蚋类吸血宿主种类筛查:PCR扩增哺乳动物和鸟类Cytb基因并测序,根据在Gen Bank中的比对结果判断宿主种类。结果:(1)共采获昆虫标本49,622头,除1头双尾纲昆虫外,均属昆虫纲,分类为8目145科,其中鞘翅目(Coleoptera)38科,双翅目(Diptera)37科,鳞翅目(Lepidoptera)30科,膜翅目(Hymenoptera)29科,半翅目(Hemiptera)7科,蜻蜓目(Odonata)2科,堾翅目(Plecoptera)1科,脉翅目(Neuroptera)1科。(2)采获蚋类标本702头,其中雌蚋531头,雄蚋171头,PCR扩增雌蚋COI基因后,获得521头的DNA条形码序列,经鉴定包括1属23种。(3)初步确定划分蚋属下蚋种的Kimura 2-parameter(K2P)距离阈值为4%,利用该阈值、生命数据条形码系统、系统发育分析及形态学特征鉴定麻子绳蚋(Simulium asakoae)153头,五条蚋(Simulium quinquestriatum)156头,双齿蚋(Simulium bidentatum)97头,昌隆蚋(Simulium chamlongi)9头,装饰短蚋(Simulium ornatum)2头,红头厌蚋(Simulium erythrocephala)1头,待定种(Simulium spp.)17种103头。(4)原虫类病原体的PCR扩增结果均为阴性。(5)在1头雌蚋(五条蚋)中扩增出乙型肝病毒基因序列。(6)在4头雌蚋中筛查到1例人Cytb基因序列(蚋种为麻子绳蚋),2例鸟类Cytb基因序列(蚋种为双齿蚋和待定种),1例为家山羊Cytb基因序列(蚋种为双齿蚋)。结论:(1)共鉴定蚋种23种,包括麻子绳蚋、五条蚋、双齿蚋、昌隆蚋、装饰短蚋和红头厌蚋等6个已知种,以及17个待定种,其中,麻子绳蚋为贵州省蚋类新记录;(2)未筛查到蚋类携带的原虫类病原体;(3)在1头五条蚋中发现与乙型肝炎病毒基因序列一致的序列;(4)贵州省蚋类吸血宿主种类包括人、家山羊及鸟类;(5)贵州省分布的麻子绳蚋、双齿蚋及1待定种为吸血蚋种。
【关键词】：蚋科 病原体 宿主偏好 遗传标记 DNA条形码 系统发育分析
【学位授予单位】：贵州医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R384.5
【目录】：

• 中文摘要4-6
• 英文摘要6-9
• 英文略缩词表9-10
• 0 引言10-13
• 1 材料与方法13-25
• 2 结果25-42
• 3 讨论42-44
• 4 结论44-45
• 参考文献45-49
• 综述49-59
• 参考文献55-59
• 作者简历59-60
• 致谢60-61
• 学位论文数据集61

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本文编号：636147