骨髓间充质干细胞对退变髓核细胞功能的逆转作用

发布时间：2017-08-09 21:11

  本文关键词：骨髓间充质干细胞对退变髓核细胞功能的逆转作用

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【摘要】：目的研究骨髓间充质干细胞(BMSCs)对退变髓核细胞(dNPCs)的营养修复作用。方法针刺抽吸法制备SD大鼠退变椎间盘动物模型,分离培养髓核细胞(NPCs)及BMSCs,并将BMSCs和dNPCs分别复合藻酸盐后等比例接种于transwell共培养系统上下室中进行体外非直接接触共培养作为实验组,单纯NPCs和dNPCs分别复合藻酸盐后作为阳性及阴性对照组。光镜下观察细胞生长情况,选取合适细胞复合藻酸盐在共培养体系中培养7 d后回收各组NPCs,对回收细胞的CollagenⅠ、Ⅱ和Aggrecan行Western blot及免疫荧光检测,RT-PCR检测CollagenⅡ、SOX9和Aggrecan的mRNA的表达情况。结果共培养7 d后,RT-PCR检测结果显示BMSCs+dNPCs组的CollagenⅡ、SOX9和Aggrecan的mRNA表达接近NPCs组,但明显高于dNPCs组(P均0.05)。Western blot检测结果显示BMSCs+dNPCs组的CollagenⅡ和Aggrecan含量接近甚至超过NPCs组,但明显高于dNPCs组(P均0.05);CollagenⅠ含量与NPCs组相近,但明显低于dNPCs组(P0.05)。CollagenⅡ和Aggrecan免疫荧光染色结果显示,BMSCs+dNPCs组和dNPCs组胞质都被染成红色,在核周围着色较深,BMSCs+dNPCs组胞质着色范围及核周围深染范围明显大于dNPCs组。结论在Transwell非直接接触共培养条件下,BMSCs能够促进dNPCs外基质的表达,提示BMSCs能够在一定程度上逆转椎间盘dNPCs的功能。
【作者单位】： 江苏大学临床医学院;江苏大学附属医院骨科;江苏大学基础医学与医学技术学院;
【关键词】： 椎间盘退变 骨髓间充质干细胞 髓核细胞 藻酸盐 共培养
【基金】：镇江市科技计划项目(SH2010031) 镇江市医学重点人才项目~~
【分类号】：R329
【正文快照】： 椎间盘是由中央的髓核和周围的纤维环组成,其上下椎体接触面由较薄的透明软骨终板覆盖。其中平行排列的胶原纤维组成外层的纤维环[1],髓核位于纤维环内层,是胶状组织,髓核细胞(nucleus pulposuscells,NPCs)是软骨样细胞,其细胞外基质成分主要由蛋白多糖和Ⅱ型胶原组成。蛋白

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本文编号：647332