脂多糖诱导小鼠腹腔巨噬细胞parkin表达及线粒体自噬形成

发布时间：2017-08-10 01:08

本文关键词：脂多糖诱导小鼠腹腔巨噬细胞parkin表达及线粒体自噬形成

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【摘要】：目的:探讨巨噬细胞在脂多糖(LPS)处理后parkin表达及对线粒体自噬的影响。方法:无菌分离并原代培养小鼠腹腔巨噬细胞;200 ng/ml LPS作用巨噬细胞,JC-1标记线粒体,流式细胞仪检测线粒体膜电位变化;RT-PCR检测巨噬细胞parkin mRNA水平;Western blot检测parkin及自噬相关蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的表达水平;激光共聚焦显微镜分别检测巨噬细胞在LPS处理前后parkin在细胞内的分布及与LC3和线粒体三者的共定位情况。结果:JC-1染色流式细胞仪检测结果显示,LPS处理后,巨噬细胞线粒体膜电位降低,并随LPS作用时间延长呈持续下降趋势;parkin mRNA在LPS处理6 h内仅有少量的增加,但parkin蛋白水平在LPS刺激6 h后增加明显;parkin在巨噬细胞定位结果表明,未受LPS处理时parkin呈弥散均匀分布,而LPS刺激后parkin呈明显的点状聚集;Western blot检测结果显示巨噬细胞在LPS刺激后,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比例增大,表明巨噬细胞发生明显的自噬;激光共聚焦显微镜结果显示,巨噬细胞在LPS刺激后,parkin、LC3和线粒体三者存在共定位关系。结论:巨噬细胞在LPS刺激后,parkin表达增加并介导线粒体自噬形成,参与对损伤线粒体的清除,可能在巨噬细胞参与的炎症反应中发挥一定的调控作用。
【作者单位】：安徽医科大学基础医学院免疫学教研室;安徽医科大学基础医学院综合实验室;
【关键词】： 巨噬细胞 脂多糖 线粒体自噬 parkin
【基金】：国家自然科学基金(30972791)资助
【分类号】：R392.1
【正文快照】： 革兰阴性菌感染机体后,巨噬细胞通过其表面膜受体,在其他辅助蛋白的共同作用下识别革兰阴性菌细胞壁成分脂多糖(LPS),引起一系列炎症因子的释放,诱发多种炎症反应,以限制清除病原菌。然而过度的炎症反应则会造成机体严重伤害[1,2]。目前认为重度炎症发生时伴随多种组织细胞的

【参考文献】

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【共引文献】

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