变频振动在模拟微重力环境下对成骨细胞增殖和分化的影响

发布时间：2017-08-11 09:41

  本文关键词：变频振动在模拟微重力环境下对成骨细胞增殖和分化的影响

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【摘要】：背景:微重力环境下的人体病理、生理学变化已经成为医学领域倍受关注的研究课题。骨骼系统是人体重要的组成部分,成骨细胞对于维持骨骼系统的稳固和发挥正常的生理功能有非常重要的意义。在太空微重力环境下,宇航员机体会发生多种病理、生理学的改变,如血液的重新分配、肌肉萎缩、骨量的丢失以及机体免疫力低下等等,其中最明显的是宇航员机体骨量的丢失、骨微结构的改变、骨密度的下降。然而目前对于微重力环境下减少骨量的丢失,临床上药物治疗或者预防尚不能达到很好的效果。研究方法:为探明在模拟微重力环境下变频振动对大鼠颅盖骨成骨细胞生物学特性的影响,本研究:1.以新生24h大鼠颅盖骨成骨细胞作为研究对象,建立体外模拟微重力细胞培养模型;2.变频振荡的设置,初始值为5Hz,其后逐渐增加至90Hz后返回至5Hz,循环往复10分钟,振动在BOSE 3100生物力学试验机上进行,失重加速为0.5g;3.利用MTT法、ALP检测试剂盒观察模拟微重力环境下对成骨细胞增殖效应和分化功能的影响;4.初步探讨在模拟微重力环境下变频振动刺激对大鼠颅盖骨成骨细胞增殖和分化的影响。结果:1.通过酶消化法分离培养了原代新生24h大鼠颅盖骨成骨细胞;采用双向多样本微重力效应模拟技术平台建立了模拟微重力环境下新生24h大鼠颅盖骨成骨细胞体外培养模型;2.通过MTT法、ALP检测试剂盒观察发现,在模拟微重力24h、48h、72h条件下,新生大鼠颅盖骨成骨细胞的增殖和分化受到抑制;3.通过MTT法观察发现,模拟微重力环境下90Hz和5~90Hz变频振动能够促进新生大鼠颅盖骨成骨细胞的增殖功能;4.通过ALP检测试剂盒观察发现,45Hz和5~90Hz变频振动刺激对模拟微重力环境下成骨细胞的分化功能具有一定的促进作用。结论:1.模拟微重力可抑制新生24h大鼠颅盖骨成骨细胞的增殖和分化2.初步证明了机械振动在模拟微重力环境下对大鼠颅盖骨成骨细胞的分化和增殖效应有一定的促进作用3.这为在模拟微重力环境下机械振动防治骨量的丢失提供了实验和理论依据。
【关键词】：模拟微重力 机械振动 成骨细胞 增殖 分化
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R85
【目录】：

• 中文摘要8-10
• 英文摘要10-12
• 前言12-18
• 第一部分 大鼠颅盖骨成骨细胞原代培养与模拟微重力环境下成骨细胞体外培养模型的建立及模拟微重力对成骨细胞增殖和分化的影响18-31
• 引言18
• 1.1 材料18-19
• 1.1.1 主要仪器18-19
• 1.1.2 主要试剂19
• 1.2 方法19-23
• 1.2.1 新生 24h大鼠成骨细胞分离、培养19-21
• 1.2.2 成骨细胞的生长曲线21
• 1.2.3 建立模拟微重力环境下成骨细胞体外培养模型21-22
• 1.2.4 模拟微重力环境对成骨细胞增殖效应的影响22
• 1.2.5 模拟微重力环境对成骨细胞分化的影响22-23
• 1.2.6 统计学方法23
• 1.3 结果23-27
• 1.3.1 成骨细胞的原代与传代培养23-24
• 1.3.2 成骨细胞生长曲线24-25
• 1.3.3 观察模拟微重力环境下成骨细胞生长状态25
• 1.3.4 MTT法检测模拟微重力对成骨细胞增殖的变化25-26
• 1.3.5 ALP试剂盒检测模拟微重力环境下大鼠颅盖骨对成骨细胞分化的影响26-27
• 1.4 讨论27-29
• 1.4.1 成骨细胞的原代培养和成骨细胞的生长曲线27
• 1.4.2 模拟微重力环境下体外培养成骨细胞模型的建立27-28
• 1.4.3 模拟微重力环境对成骨细胞增殖的影响28-29
• 1.4.4 模拟微重力环境对成骨细胞分化的影响29
• 1.5 小结29-31
• 第二部分 模拟微重力环境下变频振动对成骨细胞增殖和分化的初步探讨31-40
• 引言31
• 1.1 材料31-33
• 1.1.1 主要仪器31-32
• 1.1.2 主要试剂32-33
• 1.2 方法33-35
• 1.2.1 电磁振动台33
• 1.2.2 成骨细胞体外模型的建立33
• 1.2.3 实验分组与机械振动刺激33
• 1.2.4 变频振动在模拟微重力条件下对成骨细胞增殖功能的检测33-34
• 1.2.5 变频振动在模拟微重力条件下对成骨细胞ALP活性的测定34-35
• 1.3 统计学处理35-36
• 1.4 结果36-38
• 1.4.1 振动应力刺激在模拟微重力环境下对成骨细胞增殖效应的影响36-37
• 1.4.2 振动应力刺激在模拟微重力环境下对成骨细胞ALP活性的影响37-38
• 1.5 讨论38-39
• 1.6 小结39-40
• 全文总结40-41
• 参考文献41-45
• 附录45-46
• 致谢46-47
• 综述47-56
• 参考文献53-56

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 唐丽灵,王远亮,谷俐,蔡绍皙,潘君;不同应变水平拉伸对成骨细胞生理功能的影响[J];重庆大学学报(自然科学版);2003年03期

2 朱鸣;吴本俨;聂捷琳;李莹辉;;模拟失重对胃粘膜上皮细胞增殖和周期的影响[J];航天医学与医学工程;2005年06期

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本文编号：655443