补肾填髓方改善阿尔茨海默病模型大鼠学习和记忆能力及相关的机制研究

发布时间：2017-08-20 04:26

  本文关键词：补肾填髓方改善阿尔茨海默病模型大鼠学习和记忆能力及相关的机制研究

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【摘要】：目的:观察补肾填髓方对阿尔茨海默病模型大鼠学习记忆能力的影响及对血清和脑皮质匀浆中超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)活性及对海马线粒体超微结构的改变的作用。方法:1.将经过旷场实验初步分组的健康雄性SD大鼠50只随机分为正常组、假手术组、模型组、补肾填髓方组、多奈哌齐组,每组10只。模型组、补肾填髓方组、多奈哌齐组大鼠双侧侧脑室注射Aβ1-42,假手术组大鼠双侧侧脑室注射Aβ42-1,正常组无特殊处理。2.造模后灌胃28天,正常组、假手术组、模型组灌服生理盐水,补肾填髓方组灌服补肾填髓方药液、多奈哌齐组灌服多奈哌齐药液,灌胃期间各组大鼠自由进食饮水。3.灌胃28天后,观察各组大鼠morris水迷宫行为学改变。4.检测各组大鼠前额皮质匀浆和血清中SOD及MDA的活性。5.用透射电镜观察各组大鼠海马神经元线粒体的超微结构改变。结果:1.各组大鼠行为学的比较结果1.1各组大鼠逃避潜伏期的比较各组大鼠找到平台的时间随着训练天数的增加而逐渐缩短(F=958.165,P=0.000)。每个时间点上5组之间比较:第一天,各组之间比较无统计学意义(P0.05);第二天,与正常组比较,模型组逃避潜伏期明显较长,差异具有统计学意义(P0.05);与模型组比较,补肾填髓方组、多奈哌齐组逃避潜伏期无统计学意义(P0.05);第三天、第四天及第五天,与正常组比较,模型组逃避潜伏期明显较长(P0.01);与模型组比较,补肾填髓方组、多奈哌齐组逃避潜伏期明显较短(P0.01)。1.2各组大鼠原平台象限游泳时间、游泳距离占总游泳时间、游泳距离百分比及游泳速度的比较与正常组相比,模型组大鼠原平台象限游泳时间百分比较低(P0.01);与模型组相比,补肾填髓方组及多奈哌齐组大鼠原平台象限游泳时间百分比较高,具有统计学意义(P0.01)。与正常组相比,模型组大鼠原平台象限游泳距离百分比较低(P0.01),与模型组相比,补肾填髓方组及多奈哌齐组大鼠原平台象限游泳距离百分比较高,具有统计学意义(P0.01)。各组大鼠游泳速度无统计学意义(P0.05)。2.各组大鼠血清及组织SOD、MDA活性比较与正常组比较,假手术组前额皮质SOD活性未见明显降低(P0.05),模型组前额皮质SOD活性明显下降(P0.01);与模型组比较,补肾填髓方、多奈哌齐组前额皮质SOD活性均升高(P0.05或P0.01)。与正常组比较,假手术组血清SOD活性未见明显降低(P0.05),模型组血清SOD活性明显下降(P0.01);与模型组比较,补肾填髓方、多奈哌齐组血清SOD活性均升高(P0.01)。与正常组比较,假手术组前额皮质MDA活性无明显升高(P0.05),模型组前额皮质MDA活性显著升高(P0.01);与模型组比较,补肾填髓方、多奈哌齐组前额皮质MDA活性均显著下降(P0.01)。与正常组比较,假手术组血清MDA活性未见明显升高(P0.05),模型组血清MDA活性升高,具有差异具有统计学意义(P0.01);与模型组比较,补肾填髓方、多奈哌齐组血清MDA活性均下降,差异具有统计学意义(P0.01)。3.各组大鼠海马神经元线粒体的超微结构比较电镜图片显示,正常组和假手术组线粒体大小、形状规则,数目多,均匀分布,外膜光滑平整,线粒体膜间隙无明显扩张,线粒体内膜所构成的线粒体嵴清晰可见,排列规整,线粒体嵴呈板层状,内膜和嵴内腔充满较多的颗粒状基质,未见线粒体水肿及空泡化改变。与正常组相比,模型组线粒体大小、形状不规则,数目较少,分布不均,整体不够清晰,线粒体外膜模糊,内膜或内嵴可见大量溶解消失。线粒体肿胀及空泡样变化,基质疏松,未见基质颗粒。与模型组比较,补肾填髓方组、多奈哌齐组大鼠线粒体大小、形状相对规则,数目尚可,结构上较为完整,组织结构变清晰,外膜可见,尚光滑,内嵴变清晰,排列上比较整齐,偶可见嵴内腔稍有扩大,内嵴有少许溶解,线粒体肿胀减轻,基质尚均匀,可见少许基质颗粒;结论:1.Aβ1-42侧脑室注射能较好的复制阿尔茨海默病,模型组大鼠出现了学习及记忆能力的下降,补肾填髓方能改善AD模型大鼠的空间学习能力。2.Aβ1-42侧脑室注射复制的AD模型大鼠出现前额皮质组织和血清SOD下降,前额皮质和血清MAD升高,补肾填髓方能提高SOD酶活性,降低MAD酶活性,改善模型大鼠的氧化应激。3.Aβ1-42侧脑室注射引起大鼠海马组织线粒体超微结构受损,补肾填髓方对于改善线粒体超微结构损害具有较好的效果。
【关键词】：阿尔茨海默病 补肾填髓汤 氧化应激 线粒体
【学位授予单位】：湖南中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R285.5;R-332
【目录】：

• 本课题受下列基金资助4-5
• 中文摘要5-8
• ABSTRACT8-12
• 英文缩略词前言12-15
• 前言15-17
• 第一章 大鼠阿尔茨海默病模型的建立及空间记忆的改变17-25
• 一、实验材料17-18
• 1.1 实验动物17
• 1.2 实验用药17
• 1.3 实验试剂17
• 1.4 实验仪器17-18
• 二、实验方法18-20
• 2.1 旷场实验筛选、分组18
• 2.2 复制阿尔茨海默病大鼠模型[47]18-19
• 2.3 大鼠给药19
• 2.4 Morris水迷宫测试大鼠学习记忆能力[22]19-20
• 三、统计方法20
• 四、实验结果20-25
• 4.1 Morris水迷宫实验结果20-25
• 第二章 补肾填髓方对阿尔茨海默病模型大鼠皮层组织及血浆中SOD、MDA含量及线粒体超微结构的影响25-33
• 一、实验材料25-26
• 1.1 实验动物25
• 1.2 实验材料25-26
• 二、实验方法26-28
• 2.1 大鼠取材26
• 2.2 脑皮质匀浆及血清中SOD、、MDA含量检测方法26-28
• 2.3 透射电镜生物样品制备步骤28
• 三、统计方法28-29
• 四、实验结果29-33
• 4.1 补肾填髓方对大鼠前额皮质组织、血清SOD表达的影响29-30
• 4.2 补肾填髓方对大鼠皮质组织、血清MDA表达的影响30-31
• 4.3 补肾填髓方对AD大鼠海马神经元线粒体结构影响31-33
• 第三章 讨论33-44
• 3.1 AD模型的评价和大鼠的行为学分析33-35
• 3.1.1 AD模型的评价33-34
• 3.1.2 AD大鼠模型行为学分析34-35
• 3.2 西医对AD的认识35-38
• 3.2.1 西医对AD发病机制的认识35-37
• 3.2.2 西医对AD治疗的认识37-38
• 3.3 中医对痴呆的认识38-40
• 3.3.1 元气与肾精的关系38
• 3.3.2 肾精与痴呆的关系38-39
• 3.3.3 补肾填髓方治疗依据39-40
• 3.4 海马、前额皮质与AD的关系40-41
• 3.5 AD大鼠行为学及SOD、MDA、线粒体超微结构改变与补肾填髓方的影响41-44
• 3.5.1 补肾填髓方对大鼠行为学的影响41-42
• 3.5.2 补肾填髓方对大鼠SOD、MDA活性的影响42-43
• 3.5.3 补肾填髓方对大鼠海马线粒体超微结构的影响43-44
• 第四章 结论44-45
• 致谢45-46
• 参考文献46-52
• 综述 线粒体功能障碍与阿尔茨海默病关系的研究进展52-63
• 参考文献58-63
• 攻读硕士学位期间发表论文及从事科研情况63-64

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

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本文编号：704632