耶氏肺孢子菌主要表面糖蛋白合成及人群IgG抗体调查

发布时间：2017-08-21 10:15

  本文关键词：耶氏肺孢子菌主要表面糖蛋白合成及人群IgG抗体调查

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【摘要】：目的原核表达耶氏肺孢子菌(Pneumocystis jirovecii,Pj)主要表面糖蛋白(major surface glycoprotein,Msg)氨基端片段,获得可溶性Pj重组Msg抗原(recombinant Msg,rMsg),利用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测266例成年人外周血抗Pj rMsg IgG抗体。方法从耶氏肺孢子菌感染者的痰液获得Pj DNA,构建表达载体pGEX-3X-Pj Msg,转化感受态大肠埃希菌DE3,用异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷(IPTG)诱导表达。利用谷胱甘肽转移酶(GST)标签进行亲和纯化,对纯化Pj rMsg抗原进行鉴定并建立ELISA方法,检测266例成年人外周血抗Pj rMsg IgG抗体。结果成功构建了表达质粒pGEX-3X-Pj Msg,并诱导表达分子质量单位约39ku的可溶性Pj rMsg蛋白,产量为13mg/500ml菌液,以此为抗原,采用ELISA检测266例成年人外周血抗Pj rMsg IgG抗体,阳性率为42.5%(113/266)。其中男、女性患者阳性率分别为43.3%(58/134)和41.7%(55/132),差异无统计学意义(χ2=0.071,P0.05);20~29岁、30~39岁、40~50岁组阳性率分别为31.8%(27/85)、48.3(42/87)和46.8%(44/94),差异无统计学意义(χ2=5.911,P0.05)。结论成功表达了可溶性Pj rMsg抗原,Pj rMsg-ELISA检测结果表明北京地区成人耶氏肺孢子菌感染率较高。
【作者单位】： 首都医科大学附属北京友谊医院 北京热带医学研究所;
【关键词】： 耶氏肺孢子菌 主要表面糖蛋白 重组抗原 抗体
【基金】：北京热带病防治研究北京市重点实验室项目(No.2013RDBF03)
【分类号】：R378
【正文快照】： 耶氏肺孢子菌(Pneumocystis jirovecii,Pj)是一种引起肺部机会性感染的真菌类病原体,引起免疫缺陷患者肺孢子菌肺炎(Pneumocystis pneumonia,PCP)。PCP高危人群包括艾滋病患者,器官移植患者,接受免疫抑制剂治疗者以及营养不良的婴儿。研究表明Pj通过主要表面糖蛋白(major surf

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