针对HSV-2LATORF的siRNA在病毒潜伏激活中的作用
本文关键词:针对HSV-2LATORF的siRNA在病毒潜伏激活中的作用
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【摘要】:目的观察疱疹病毒2型潜伏相关转录子开放阅读框架(HSV-2 LAT ORF)在病毒潜伏感染激活中的作用。方法体外建立HSV-2潜伏感染及复发的神经细胞模型,对病毒在细胞中的潜伏和激发进行PCR验证及测序;设计针对LAT ORF的siRNA,激活诱导后转染SH-SY5Y细胞,检测转染前后LAT ORF的表达改变;制备HSV-2基因表达谱芯片,利用芯片分析抑制LAT ORF后病毒基因表达的改变。结果在人神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y上成功建立了HSV-2潜伏感染及激活的细胞模型,LAT、gG基因PCR扩增及电泳结果证实了病毒在细胞中的潜伏及激活;LAT ORF-siRNA转染细胞24、36、48h后,LAT ORF mRNA的表达水平分别降低了39%、51%和60%。基因芯片分析干扰后病毒基因表达,共有28个基因出现差异表达,其中24个基因下调,4个基因上调。结论 LAT ORF在HSV-2潜伏感染激活中发挥了重要作用,为下一步分析LAT在病毒潜伏激活中的调控机制奠定了基础。
【作者单位】: 广州军区广州总医院检验科;南方医科大学基因工程研究所;广州南沙榄核医院检验科;
【关键词】: 疱疹病毒型 病毒潜伏期 RNA干扰 寡核苷酸序列分析
【基金】:广东省科技计划项目(2011B061300021)~~
【分类号】:R373
【正文快照】: 疱疹病毒2型(HSV-2)是人类病毒性疾病的常见病原体之一,其潜伏感染及激发是生殖器疱疹易复发、难根治的主要原因。潜伏相关转录子(LAT)编码蛋白在HSV感染的复发中起重要作用,是研究HSV感染复发过程中信号转导途径及特异性基因治疗的理想靶标。本研究建立稳定的HSV-2潜伏感染及
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