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乙型脑炎病毒NS1蛋白原核表达及其免疫原性分析

发布时间:2017-08-25 01:07

  本文关键词:乙型脑炎病毒NS1蛋白原核表达及其免疫原性分析


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【摘要】:目的采用大肠杆菌系统表达乙脑病毒NS1蛋白,并对表达产物进行免疫原性分析。方法将乙脑病毒NS1基因克隆入pET30a载体中,表达产物经Ni+亲和层析纯化后行SDS-PAGE和Western blot分析;并将纯化产物免疫新西兰大白兔,获得的免疫血清作间接ELISA及免疫荧光检测。结果重组JEV NS1蛋白获得表达并纯化成功;Western blot结果显示纯化蛋白能与JEV免疫的鼠多克隆腹水反应;兔免疫血清的间接ELISA结果显示血清效价达到1∶51 200以上;免疫荧光结果显示血清作1∶50、1∶100、1∶200稀释时,JEV感染的BHK细胞均显示荧光。结论重组NS1蛋白能在大肠杆菌系统中获得表达;纯化产物具有免疫原性,为进一步研究NS1蛋白的生物学特性及乙脑病毒的诊断试剂提供参考依据。
【作者单位】: 贵阳医学院公共卫生学院环境卫生学教研室;中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所;
【关键词】乙型脑炎病毒 非结构蛋白 原核表达 免疫原性
【基金】:国家“十二五”科技重大专项(2012ZX10004219)
【分类号】:R373
【正文快照】: 流行性乙型脑炎病毒(epidemic encephalitis Bvirus)又称日本脑炎病毒(Japanese encephalits vi-rus,JEV),可引起以中枢神经系统损害为主的急性传染病,在中国多省均有流行报道[1-2]。JEV是黄病毒科黄病毒属的成员,为单股正链RNA病毒,基因组长约ll kb,基因结构为含5'和3'非编码

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