小鼠附睾脂肪干细胞的分离培养及鉴定

发布时间：2017-09-08 06:41

  本文关键词：小鼠附睾脂肪干细胞的分离培养及鉴定

  更多相关文章： 干细胞 脂肪组织 附睾 小鼠 近交BALB C 细胞 培养的 脂肪干细胞 小鼠 差速贴壁 培养

【摘要】：背景:脂肪干细胞作为一种新的成体干细胞,具有来源丰富、取材容易、增殖能力强等优点,受到人们越来越多地关注。目的:体外分离培养小鼠附睾脂肪组织中的脂肪干细胞,并鉴定其生物学特性。方法:无菌切取小鼠附睾处脂肪组织,采用胶原酶进行消化,利用1次消化多次收集与差速贴壁法分离纯化脂肪干细胞。倒置显微镜及透射电子显微镜观察脂肪干细胞的形态。绘制脂肪干细胞的生长曲线。流式细胞术检测脂肪干细胞的免疫表型。加入细胞诱导剂对脂肪干细胞进行成骨及成脂肪的诱导分化。扫描电子显微镜观察脂肪干细胞与胶原支架材料的相容性。结果与结论:倒置显微镜下可见脂肪干细胞呈长梭形或成纤维细胞样,密集排列成漩涡状或成束状交织,可在体外稳定传至第9代。透射电子显微镜下可见脂肪干细胞表面有丰富的微绒毛结构,细胞核体积大,细胞质内可见线粒体、粗面内质网等细胞器。脂肪干细胞表达CD44、CD29,不表达CD34。经成脂肪诱导剂诱导后,多数脂肪干细胞胞质内可见小脂滴,油红O染色可将小脂滴染成红色。经成骨诱导剂诱导后,在脂肪干细胞生长密集区域内的细胞结构模糊、细胞间界限不清楚。经茜素红染色后,可见较多大小不一的折光率较强颗粒状结构沉积。扫描电子显微镜观察到脂肪干细胞呈铺展状生长于胶原支架材料上。结果表明该方法分离出的脂肪干细胞能在体外扩增并稳定传代,在一定诱导条件下,能够分化为成骨细胞和脂肪细胞并且与胶原支架具有良好的相容性。
【作者单位】： 吉林大学第四医院;吉林大学病理生物学教育部重点实验室;吉林大学基础医学院病理学系;吉林大学;
【关键词】： 干细胞 脂肪组织 附睾 小鼠 近交BALB C 细胞 培养的 脂肪干细胞 小鼠 差速贴壁 培养
【基金】：吉林省科技发展计划青年科研基金资助项目(20090192)~~
【分类号】：R329
【正文快照】： 0引言Introduction组织工程学是生物医学工程学中的新的分支,是应用生命科学和工程学的原理与技术,设计、构造、改良、培育和保养活组织,以修复或重建组织器官的结构,维持或改善组织器官功能的一门新兴的边缘学科。组织工程学中最主要的研究内容包括:种子细胞、供种子细胞生长

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