人巨细胞病毒PP65抗原ELISA检测方法的建立

发布时间：2017-09-08 09:27

  本文关键词：人巨细胞病毒PP65抗原ELISA检测方法的建立

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【摘要】：目的用制备好的兔和大鼠PP65多克隆抗体建立检测人巨细胞病毒PP65抗原的ELISA方法。方法优化ELISA检测条件,建立检测PP65抗原的标准曲线,确定检测方法的精密度及检出下限。通过对101份临床疑似HCMV感染标本的检测,并与HCMV-IgM(ELISA)以及HCMV-DNA(FQ-PCR)检测结果的比较,分析了该方法的敏感性和特异性。分别检测HSV-1、HSV-2以及EB病毒感染血标本各5份,分析该方法是否非特异结合疱疹病毒科其他病毒抗原。结果以1∶2 000大鼠pAb包被酶标板,以1∶20 000兔pAb为检测一抗,建立了检测PP65抗原血症的ELISA方法。批间精密度与批内精密度均小于10%,检出下限为5 ng/ml。本方法检测的敏感性和特异性与HCMV-DNA(FQ-PCR)无差别(P0.05),但敏感性高于HCMV-IgM(ELISA)方法(P0.05)。对HSV-1、HSV-2以及EB病毒感染标本的检测结果均为阴性,排除了该方法非特异结合疱疹病毒科其他病毒抗原的可能。结论建立了检测PP65抗原血症的间接双抗夹心ELISA方法,该方法具有较好的敏感性、特异性、稳定性和重复性。
【作者单位】： 山西医科大学微生物与免疫教研室;
【关键词】： 人巨细胞病毒 PP ELISA 多克隆抗体
【基金】：山西省科技开发基金资助项目(033068)
【分类号】：R392-33
【正文快照】： 人类巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)属疱疹病毒科β属双链DNA病毒。HCMV在人群中感染非常普遍,正常成人HCMV抗体阳性率为76.7%~95.8%[1]。初次感染后病毒大多潜伏体内,但在艾滋病、器官移植、恶性肿瘤等免疫功能减弱或受抑制的人群中潜伏病毒可继发感染引起严重并发

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